三七总皂苷对同型半胱氨酸损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

三七总皂苷对同型半胱氨酸损伤人脐静脉内皮细胞的保护

作用

Jiang Wei;Sun Aoqi;Li Xuan;Gao Nan

【期刊名称】《中国药师》 【年(卷),期】2019(022)007

【摘要】目的:探讨三七总皂苷(PNS)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其分子机制.方法:采用高浓度Hcy(250μmol·L-1)与人脐静脉内皮细胞共同孵育24 h建立体外损伤模型,实验分为正常对照组、模型组、PNS高、中、低剂量干预组;其中,Western blot实验分为正常对照组、模型组、NF-κB信号通路特异性抑制剂BAY11-7082干预组、PNS 100μg·ml-1+BAY 11-7082干预组、PNS 100μg·ml-1干预组.药物干预组预先用相应药物孵育1 h,再加入Hcy共同孵育24 h.应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,硝酸还原酶法检测细胞培养上清中一氧化氮(NO)水平,黄嘌呤氧化酶法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,酶联免疫分析法(ELISA)检测内皮素-1(ET-1)分泌水平,化学荧光法检测活性氧簇(ROS)水平,RT-PCR检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和ET-1 mRNA表达,Western blot检测核因子κB(NF-κB p65)、iNOS蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型组细胞增殖活力下降、SOD活性和NO分泌量显著降低、ROS、ET-1和MDA水平显著增加(P<0.01);iNOS、ET-1基因表达明显增加,eNOS基因表达降低,NF-κB p65、iNOS蛋白表达明显增加(P<0.01).与模型组比较,PNS干预可显著增强细胞增殖活力、提高SOD活性和NO分泌量、降低ROS、ET-1和MDA水平(P<0.01),下调iNOS、ET-1基因表达,上调eNOS