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体外微核试验方法研究进展

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体外微核试验方法研究进展

癌变 畸变 突变  1999年第11卷第2期               CarcinogenesisTeratogenesisandMutagenesisVol11No21999

体外微核试验方法研究进展

吕晓华 综述 张立实 王瑞淑 审校

华西医科大学营养与食品卫生学教研室 成都 610041

  微核是细胞有丝分裂后期仍滞留在细胞质中的淋巴细胞用于体外微核试验以来,研究者对实验方法染色体断片或染色单体。随着微核形成机理和意义不断改进完善,特别是Fenech等建立了加细胞松弛的阐明以及检测手段和实验技术的不断改进和完善,素B(CYB)的胞质分裂阻断法,将计数微核的细胞局目前微核试验已被公认为筛选致突变物的主要方法限于双核细胞后,提高了试验的灵敏度,并且使试验之一,在预测致癌危险性、检测非整倍体诱发剂及其程序标准化,已得到广泛的推广使用(1-3)。因为体它遗传危害方面也得到广泛应用。

外微核试验收获细胞时要低渗,而细胞经化学物质处

与体内试验相比,体外微核试验更加简便、快速、理后,细胞膜对低渗的耐受性发生改变,使低渗不易耗费低,不受动物个体差异等因素的影响,而且可以掌握,,用离心制测出某些较低浓度的化学物诱导的微核反应,灵敏度片机制片,,胞浆与胞核的比较高。经方法的改进和计数自动化的逐步实现,除去,了一些造成假阳性和影响实验结果准确性的人为因(4),素,使实验结果的可靠性不断增加。Giemsa染色,这种方法较适合骨,但对淋巴细胞染色不太理想,因为。1 111 人外周血淋巴细胞微核试验

淋巴细胞微核与淋巴细胞内的Gall小体、Kurloff小体及淋巴细胞经理化因素作用后产生的毒性颗粒难于鉴别,因此许多研究者对淋巴细胞染色方法进行了探讨。Iskandar建议用R66(Garr)2%Giemsa,也有人

培养人外周血淋巴细胞微核试验是近年来最常用Jenner-Giemsa、May-GrunwaldGiemsa染色,还用的体外短期测试方法之一,其方法简便,所需血量有人提出用瑞氏和苏木精染色等。Harleguin荧光染少,取材容易,实验结果准确可靠,在评价理化因素对色法和改良荧光Giemsa染色技术也曾应用在微核染人体细胞的遗传毒性及监测环境、职业接触中的有害色中,以提高微核的检出率,减少细胞增殖动力学的因子对人体的潜在致癌作用方面尤为适用。外周血影响。八十年代日本学者Hayashi等首先将A1O(即淋巴细胞是对电离辐射较敏感的细胞之一,故该试验吖啶橙,AcridineOrange)染色法应用于体内微核试还广泛用于急性辐射病的早期诊断。自从人外周血验(5),以后国内外学者又将其应用于各类体外微核

4 AllsoppRC,VaziriH,PattersonC.Telomerelengthpredictsreplica2tioncapacityofhumanfibroblasts.PNASUSA,1992;89:101145 RohmeD.Evidenceforarelationshipbetweenlongevityofmammi2alianspeciesandlifespanofnormalfibroblastsinvitroanderythro2cytesinvivo.PNASUSA,1981;78:5009

6 SolterD,KnowlesBB.Monoclonalantibodydefiningastagespecific

mouseembryonicantigen(SSEA21).PNASUSA,1978;75:55657 JamesAT,JosepIE,SanderSS,etal.Embryonicstemcelllinesde2

rivedfromhumanblastocysts.Science,1998;282:1145

8 BodnarAG,OuelletteM,FrolkisM,etal.Extensionoflifespanby

introducationoftelomeraseintonormalhumancell.Science,1998;279:349

9 ThomsonJA,KallshmanJ,GelosTG,etal.Isolationofaprimate

embryonicstemcellline.PNASUSA,1995;92:7844

10 EliotM.Averscetilecelllineraisesscientifichopes,legalquestion.

Science,1998;282:1014

11 JohnG.Newpatentialforhumanembryonicstemcells.Science,

1998;282:1061

(1998-12-01投稿;1999-01-30修回)

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