恩诺沙星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究

恩诺沙星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究

吴　波１　段龙川２　罗厚强２　杨飞萍３

（１温州市动物疫病预防控制中心　温州　３２５０００　２温州科技职业学院动科系　温州　３２５００６３温州市农产品检测中心　温州　３２５０００）摘要】为了掌握恩诺沙星在黄羽肉鸡不同组织内的残留消除规律，确定该品种肉鸡的合理休　　【

／药期。饲料中分别添加５喂饲５０、１００和２００ｍＬ三个梯度剂量的乳酸恩诺沙星，０日龄黄羽肉ｇ，连续用药７ｄ分别在停药后０、肝和肾等组织采样，鸡，３、５、７、８、９、１０、１２、１５、２０ｄ时间点对肌肉、／／用Ｕ临床用药量）动物肌ＰＬＣ－ＭＳＭＳ方法测定乳酸恩诺沙星残留浓度。结果１００ｍＬ试验组（ｇ肉、肝、肾在分别停药１药物残留量才低于最高残留限量，分别为０．０、７、７ｄ后，０５５、０．１７８、／。结果表明临床用药量乳酸恩诺沙星对于黄羽肉鸡的休药期应在１０．１５９ｍｋ０ｄ以上。ｇｇ

／ＰＬＣ－ＭＳＭＳ；黄羽肉鸡　　关键词：恩诺沙星；Ｕ

DOI:10.14170/31-1278/s.2014.06.002

，ＥｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎＥＦ）是广泛应用于畜　　恩诺沙星（

主要用于禽养殖业中的第三代氟喹诺酮类抗菌药，１〕

，治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染〔作为动物专用抗菌药物，具有抗菌谱广、杀菌活性强、与其他抗

２〕

。已备受兽医界重视〔菌药物无交叉耐药性等特点，

恩诺沙星在畜禽组织中的残留标志物为恩诺沙星

），及其活性代谢物环丙沙星之和（其在组织内ＥＦｓ分布快而广泛，并且在组织中的浓度要高于血浆中

３〕

。的浓度，在动物体内消除缓慢，半衰期长〔在养殖生产中，滥用恩诺沙星的现象普遍存

在，不仅造成畜禽中毒、病原菌对该类药物耐药等

４〕

，问题〔还会造成兽药在畜禽可食组织中的残留，严

重影响人类健康。中华人民共和国农业部２３５公告

喹诺酮类药物。

１．２　方法

１．２．１　试验动物分组。试验黄羽肉鸡分为试验组

和对照组，低、中、高三个梯度剂量试验组各４０羽，对照组４０羽。自由采食和饮水。１．２．２　饲养及给药方法。笼养，从５对照组仅饲喂基础日粮；试验组饮０日龄开始，

／水中分别以５０、１００和２００ｍＬ水平添加乳酸恩ｇ诺沙星，连续给药７ｄ后停药，停药后于不同时间点

测定试验动物可食组织中ＥＦｓ残留量。１．２．３　采样。于停药后０、３、５、７、８、９、１０、１２、１５、

称重２０ｄ时间点从对照组和试验组各抽取４羽鸡，

后立即屠宰，进行取样。每羽鸡各取胸肌和腿肌约、全肝、全肾，将样品编号后置于－２２５ｇ０℃冷冻保

待测。存，１．２．４　样品前处理。取（５±０．０２）ｇ经切碎匀浆的畜禽可食组织样品，置于５０ｍＬ具塞离心管中，加入约５ｇ无水硫酸钠和２涡旋混匀０ｍＬ乙腈，，／超声５ｍ以８２ｍｉｎ，ｉｎ０００ｒｍｉｎ冷冻离心５ｍｉｎ。　将上层提取液转移至１残渣００ｍＬ棕色鸡心瓶中，再加入２重复上述操作１次。合并提取０ｍＬ乙腈，液，向鸡心瓶中再加入１０ｍＬ异丙醇。在４０℃以下水浴减压浓缩至近干，再用氮气吹干。准确加入涡旋混匀溶解残留物，转移到１．００ｍＬ初始流动相，

再加入１ｍ１０ｍＬ具塞聚丙乙烯离心管中，Ｌ正己

／，以１取下层液烷混匀，００００ｒｍｉｎ冷冻离心５ｍｉｎ　过０．滤液待测定。２μｍ微孔滤膜，

１．２．５　色谱条件。ＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＴＭＢＥＨＣ１８；色谱柱（１００ｍｍ×２１ｍｍ，１．７μｍ；Ｗａｔｅｒｓ公司）柱温３样品温度１进样体积５μ５℃；０℃；Ｌ；流动相体积分数）甲酸水溶液；流速Ａ为乙腈，Ｂ为０．１％（

／０．２５ｍＬｍｉｎ。

／、规定的最高残留限量（为：肌肉０．ＭＲＬ）１ｍｋｇｇ

／、／。恩诺沙星在健肝脏０．肾脏０．３ｍｋ２ｍｋｇｇｇｇ

５～９］

，康畜禽体内药物动力学的研究已有不少报道［

但是在黄羽肉鸡可食组织内药物残留消除规律研

究尚未见报道。笔者通过恩诺沙星药物在黄羽肉为合理休药提供参考。鸡组织内的残留消除试验，

１　材料与方法

１．１　材料

由浙江１．１．１　主要药品及仪器。乳酸恩诺沙星：国邦药业有限公司提供，批号１２１１０８１，含量－

／临床推荐用量为混饮，鸡１９９．５％；００ｍＬ。恩诺ｇ沙星标准品：由Ｄｒ．ＥｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒＧｍｂＨ公司提供，　

含量９由Ｄ９．２３％。环丙沙星标准品：ｒ．Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆ－含量９ｅｒＧｍｂＨ公司提供，９．１８％。ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣｅｖｏＴＱ超高效液相色谱－串联质谱联用－Ｘ　

）源；配有电喷雾离子（高速冷冻离心机，超仪：ＥＳＩ旋转蒸发仪，漩涡混匀器。声清洗仪，

体重１．１．２　试验动物。５０日龄黄羽肉鸡１６０羽，（），雌雄各半，试验前确保没有使用氟１．５±０．２ｋｇ

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