现代免疫分析方法最新进展

医学研究杂志２０１０年１０月第３９卷第１０期

综述与迹展

现代免疫分析方法最新进展

劳海苗

吴英松

刘天才

现代免疫分析技术是免疫分析技术在现代生物医学领域一个重要的研究课题。本文重点介绍现代免疫分析技术方法的最新进展情况，预测了其发展趋势为基于量子点技术的一种新型多元均相时间分辨荧光免疫分析方法，为今后实现快速便捷、高灵敏度、微量化及高通量化的现代免疫分析技术提供科学依据，具有十分广阔的发展前景。

一、现代免疫分析方法的研究进展

免疫分析技术已广泛应用于临床分析检测，是现代生物医学领域一个重要的研究课题。时至今日，免疫分析技术从传统走到现代，从放射免疫分析法发展到均相时间分辨荧光免疫分析方法的出现，是科学研究不断深入的结果，是免疫分析技术发展的必然趋势。现代免疫分析方法最早的形式就是放射免疫分析法（ＲＩＡ），１９５９年由Ｂｅｒｓｏｎ和Ｙａｌｌｏｗ等人首次使用…。这种传统的分析方法特异性强，灵敏度高，抗体抗原易用碘放射性核素标记，应用广泛。但其最大的缺憾是带来的放射性污染难以处理，操作人员的健康受到威胁，这大大限制了试剂的使用寿命，因为放射性核素的衰减周期等因素，难以获得长期稳定的标准线，导致较高的操作成本。即使有所改善，并实现了商业化，但仍然难以克服检测昂贵的检测成本，仍无法实现理想的长时间连续自动化分析，难以消除非特异性干扰信号等等缺点。因此，该技术的发展还存在困难，导致现代免疫分析减少采用放射性核素标记，其结果就是，非放射性免疫分析方法在分析检验领域逐渐得到普及拉１。

近半世纪以来，多种非放射性免疫分析技术日新月异：酶联免疫分析、生物发光分析、电化学发光免疫分析、化学发光免疫分析、荧光偏振免疫分析、时间分辨荧光免疫分析等等。尽管这些分析方法通过不断

基金项目：国家自然科学基金资助项目（２００９。３０９０１３８２）；高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金课题；广东省高校人才引进专项资金；南方医科大学引进人才科研启动基金

作者单位：５１０５１５广州，南方医科大学生物技术学院通讯作者：刘天才，电子信箱：［ｉｕｔｃ＠ｆｉｍｍｕ．ｔｏｍ

万方数据

改进日趋成熟，但是，它们依然存在检测样品下限浓度不够低，灵敏度不高，很难定性定量地一次性检测同一个分析体系中产生的不同检测信号，而且微量化、自动化、高通量化程度都不高等缺点。克服传统免疫分析方法的不足，研发更加快捷、高效、灵敏、可靠、安全的多元免疫分析方法已经成为现代免疫技术发展的必然趋势。

二、多元免疫分析方法

多元免疫分析方法拥有较传统免疫分析更具独特性的优势：可一次性对多个待分析物进行检测，能有效降低采样偏差，通量更高，检测下限浓度低，灵敏度高，可进行痕鼍检测，有效提高筛选质量，从而减少昂贵分析样品的用量，极大地降低了分析成本。

多元免疫分析方法发展至今已有免疫聚合酶链反应技术、蛋白质微阵列芯片技术、流式细胞术以及量子点技术等等。免疫聚合酶链反应技术这种基因扩增技术因其简单易行，应用现已极为广泛，但其受到影响的因素很多，如核酸纯化过程中出现的扩增反应抑制物、扩增仪孔问温度的差异以及核酸提取中的随机误差均可导致假阴性的出现；又如，核酸提取中标本问的交叉污染，以及前扩增产物的污染等也易导致假阳性结果。诸多影响因素给检验结果带来许多不确定性，因此该分析方法对实验室环境要求极为严格，不宜普及化。蛋白质微阵列芯片技术具有高通量、微型化、自动化和成本低等特点，属于一种固相免疫分析方法，存在冲洗未反应的游离标志物等分离步骤，生产和检测过程人为干扰因素多、难以标准化，生化反应条件和过程不可控、反应效率较低，检测结果重复性较差等。流式细胞术是发展比较完善的现代免疫分析技术，但其检测所需的设备和试剂盒昂贵，导致分析测试成本较高。

而量子点技术是最近应用于免疫分析中的。量子点以其自身特点，仅仅改变其尺寸大小，即可发射不同颜色的荧光，而且可以在同一激发波长下同时激发，荧光发射峰最大半峰宽窄而对称，抗光漂白性极强，亮度高。这些独特的光学性质在生物医学应用中

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