专题1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指通过,对生物的基因进行,然后导入,并使在受体细胞中 ,产生人类所需的基因产物的技术。基因工程又被称为 。
(一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”—— (1)来源:
主要是从中分离纯化出来的。 (2)功能:
能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列,并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有。
(3)结果:
经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:和。 2.“分子缝合针”——
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较: ①相同点:都缝键。 ②区别:
E·coliDNA连接酶来源于,只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合,但连接平末端的之间的效率。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:
DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”—— (1)载体具备的条件: ① ② ③
(2)最常用的载体是,它是一种 (3)其它载体:
(二)基因工程的基本操作程序 第一步:
1.目的基因是指:。 2方法1;2;3.
原核基因最好采取获得,真核基因最好利用。 3.PCR技术扩增目的基因 (1)原理: (2)过程:
第一步:加热至90~95℃ 第二步:冷却到55~60℃, 第三步:加热至70~75℃, 第二步:
1.目的:使目的基因在受体细胞中。 2.组成:
(1)启动子:是一段有特殊结构的,位于基因的,是识别和结合的部位,能启动基因,最终获得所需的。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的,位于基因的。使终止。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中,从而将筛选出来。常用的标记基因是。 第三步: 转化的概念: 2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是,其次还有等。
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是。此方法的受体细胞多是。
将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是,最常用的原核细胞是,其转化方法是:先用处理细胞,使其成为,再将溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。
3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是。 第四步:
1.首先要检测,方法是采用。 2.其次还要检测,方法是采用。
3.最后检测,方法是从转基因生物中提取,用相应的进行。 4.有时还需进行的鉴定。如。 (三)基因工程的应用 1.植物基因工程:
2.动物基因工程:
3.基因治疗:
(四)蛋白质工程的概念 1.概念
蛋白质工程是指以作为基础,通过,对现有蛋白质进行,或制造一种,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产的蛋白质)
2.请画出蛋白质工程流程图
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