个菌落，则原菌液中每毫升有该微生物________个，该方法所得测量值比实际值偏低，原因是____________________。
(4)④接种的微生物是________，为降低乙醇生产成本，可利用________技术使酶能够重复使用。 【答案】 (1). 纤维二糖 (2). 稀释涂布平板(平板划线) (3). 刚果红 (4). 产生透明圈 (5). 2.7×10 (6). 当几个细胞比较靠近时可能通过分裂只形成一个菌落 (7). 酵母菌 (8). 固定化酶
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（1）根据前面的分析，葡萄糖苷酶能将纤维素二酶分解为葡萄糖。
（2）为了筛选出纤维素分解菌，常采用稀释涂布平板法接种到含刚果红染液得到培养基中，挑取培养基上产生透明圈的菌落。
（3）根据1个菌落由1个细菌繁殖而来，结合题意，原菌液中每毫升有该微生物
270×106=2.7×108 个。由于当几个细胞比较靠近时可能通过分裂只形成一个菌落的情况，所以该方法所得数值比实际值偏低。
（4）因为产物为乙醇，则④应接种酵母菌。为降低乙醇生产成本，可利用固定化酶来使酶重复利用。
【点睛】解决此题的关键是，理解记忆课本中有关利用微生物分解纤维素生产乙醇的基础知识，做到灵活运用。
12. 苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫。若将抗菜青虫的Bt毒蛋白基因转移到优
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质油菜中，可培育出转基因抗虫的油菜品种，过程如图所示。
回答下列问题：
(1)Bt毒蛋白基因在基因工程中被称为________。已知此基因的全部序列，可以通过________法获取此基因。获取后，将微量的DNA模板与________、适量的缓冲液、四种dNTP溶液、________等放在PCR扩增仪中扩增。
(2)成功获得抗菜青虫的油菜后，可通过植物细胞工程进行大批量繁育，其理论依据是________________；已经分化的油菜细胞，经过激素诱导，可以脱分化形成具有分生能力的________，再进一步培养成植株。
(3)种植转基因抗虫油菜的意义在于__________________________________________。 【答案】 (1). 目的基因 (2). 人工合成(或化学合成) (3). 引物 (4). 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶) (5). 植物细胞的全能性 (6). 愈伤组织 (7). 减少农药的使用，以减轻环境污染
【解析】试题分析：基因工程的操作四部曲：(1)目的基因的获取：常用的方法有从基因文库中获取、逆转录法、PCR技术扩增、化学合成法等；(2)基因表达载体的构建：常用同种限制酶切割运载体和目的基因之后，用DNA连接酶连接；(3)将目的基因导入受体细胞：植物细胞常用的有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；动物常用显微注射法；微生物常用钙离子处理法；(4)目的基因的检测与表达：分子水平的检测有DNA分子杂交技术检测目的基因存在、分子杂交技术检测是否转录、抗原抗体杂交技术检测基因是否表达，还有个体水平的检测等。 （1） Bt毒蛋白基因在基因工程为目的基因；如果已知此基因的全部序列，可以通过人工合成(或化学合成)法获取此基因。通过PCR技术扩增目的基因，需要将微量的DNA模板与引物、适量的缓冲液、四种dNTP溶液、具热稳定的DNA聚合酶等放在PCR扩增仪中扩增。
（2）成功获得抗PVY马铃薯后，通过植物组织培养技术进行大批量繁育转基因植株，其理论依据是植物细胞的全能性。高度分化的植物细胞经过激素的诱导，可以脱分化形成具有分生能力的薄壁细胞，进而形成愈伤组织，再分化形成胚状体，再进一步培养成植株
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（3）种植转基因抗虫油菜的意义在于减少农药的使用，以减轻环境污染。
【点睛】注意：只有已知目的基因的全部碱基序列，才能采用人工化学方法合成目的基因，否则只能从基因文库中提取或者通过PCR技术扩增获取目的基因。
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