伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，据题意可知，25 cm2毛巾样本中的活菌数为(49＋48＋47)÷3÷0.1×5＝2.4×103。
【答案】 (1)小于 用滤膜过滤除菌
(2)氮源 琼脂 调整pH 高压蒸汽灭菌锅 防止培养血盖上的冷凝水落入培养基造成污染 鉴别
(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 2.4×103
5．(2017·河南毕业班测试)纤维素酶在生物燃料制作、布料处理中起重要作用。目前，利用微生物提高纤维素酶产量是主要发展方向。如图甲，用紫外线照射含有纤维素分解菌的土样，进行分离、培养，再检测各菌株的纤维素酶的产生量。请回答下列相关问题：
甲
(1)紫外线照射的目的是________________，A0组未经紫外线处理，其作用是作为________。
(2)经高压灭菌锅灭菌的培养基，需要冷却后才能用来倒平板。常用于估计培养基已冷却到50 ℃左右的简便方法为_____________________。
(3)上述培养皿中的培养基除含有水和无机盐、酵母膏、水解酪素、琼脂等外，还应有________，目的是选择纤维素分解菌。
(4)上述检测结果如图乙所示。由图可知，________组酶活力与A0组相同，最可能的原因是___________________。
乙
【解析】 (1)紫外线属于诱发基因突变的物理因素，通过紫外线照射后细菌突变频率大大提高，从而可能筛选出人类需要的高产菌株；A0组未经紫外线处理，为对照组。(2)用手触摸盛有培养基的锥形瓶刚刚不烫手时的温度是50 ℃左右。(3)以纤维素作为唯一碳源的培养基上只有产纤维素酶的细菌才能存活。(4)据图乙可知A5组纤维素酶的含量与对照组相同，由于基因突变具有低频性的特点，该组可能没有发生基因突变。
【答案】 (1)诱发基因突变，提高突变频率，获得高产的纤维素分解菌 对照
(2)用手触摸盛有培养基的锥形瓶刚刚不烫手 (3)纤维素
(4)A5 没有发生基因突变
6．(2017·河南郑州二测)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。
KH2PO4 Na2HPO4 1.4 g 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 蛋白胨 1.0 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g (1)根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？__________(填“能”或“不能”)原因是__________。
(2)通常培养基用__________方法灭菌，培养皿用__________方法灭菌，待培养基冷却到__________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在__________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止___________，以免造成污染。
(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________就能大约推测出样品中活菌数。
(4)培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________。
(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过__________处理后才能丢
弃，以防止微生物的扩散。
【解析】 (1)因培养基中有尿素以外的氮源——蛋白胨，故该培养基不能用于分离土壤中分解尿素的细菌。(2)培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌。平板冷却凝固后倒置可防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(3)稀释涂布平板法接种可用于菌体计数。因每个菌落均由单个菌体繁殖形成，故可以统计平板上的菌落数而推测出样品中的活菌数目。(4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生从而判断培养基是否被污染。(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须进行灭菌处理，以防微生物污染环境。
【答案】 (1)不能 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素) (2)高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 培养皿皿盖上的水珠落入培养基 (3)稀释涂布平板 菌落数目 (4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (5)灭菌
B组 能力提升
7．(2017·贵阳一检)某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图所示。(注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验条件适宜；实验操作规范等)请回答相关问题。
(1)在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的________和________条件；另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。
(2)据图可知，研究小组采用的是______________法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9 mL生理盐水的4支试管________，并编号1～4号；第二步，用移液管从样品中吸取1 mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推。4号试管
的稀释倍数是____________。
(3)资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%～15%NaCl肉汤中生长。本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为________培养基，以利于金黄色葡萄球菌生长，抑制或阻止其他微生物的生长。
(4)在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1 mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为________。
【答案】 (1)营养 环境 (2)稀释涂布平板 灭菌 104 (3)选择 (4)3.6×105
8．(2017·山东枣庄一模)运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。 (1)某科普实验小组欲从石油污染的水域中筛选出能高效降解石油的微生物。请回答：
①从水体中分离纯化菌种时，若要获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。②在筛选过程中，应将菌液接种于以石油为唯一碳源的固体培养基上，在微生物培养前，需对培养基进行__________，该培养基从功能上看属于__________。
(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用__________法来分离提取，还可以用__________和蒸馏等提取植物芳香油的方法。
【解析】 (1)平板划线法用接种环接种，接种环采用灼烧灭菌的方法灭菌。培养基要进行高压蒸汽灭菌。以石油为唯一碳源的固体培养基属于选择培养基。(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用有机溶剂萃取法来分离提取，除了萃取，还有压榨和蒸馏等方法。
【答案】 (1)接种环 灼烧 灭菌 选择培养基 (2)萃取 压榨
9．(2015·全国卷Ⅰ)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌
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