【小初高学习]2016-2017学年高中生物 专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序(练)

教育精品学习资源 回答下列问题：

（1）Bt杀虫蛋白基因来自苏云金杆菌。可利用苏云金杆菌细胞内合成的__________通过逆转录形成单链DNA片段，从而获得目的基因。在生物体外采用PCR技术扩增目的基因，扩增时需要加入引物，其引物是____________________。

（2）除了通过上述方法可以获取Bt杀虫蛋白基因外，还可以通过化学合成的方法获取Bt杀虫蛋白基因，其前提条件是通过Bt杀虫蛋白的__________推导出mRNA核苷酸序列，再合成该基因的脱氧核苷酸序列，这样合成的目的基因与从cDNA文库获取的目的基因相比，脱氧核苷酸序列可能不相同，原因是____________________。

（3）构建基因表达载体时，通常用同种限制性核苷酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，原因是______________________________。用农杆菌转化法将基因表达载体导入植物细胞，此过程利用了Ti质粒具有__________特点。

（4）从个体生物学水平鉴定转基因马铃薯的培育是否成功，需要对转基因马铃薯进行__________________。

【答案】 （1） mRNA 能与目的基因配对的一段脱氧核苷酸序列（2） Bt杀虫蛋白的氨基酸序列 密码子具有简并性（一个氨基酸可对应多种密码子） （3） 使目的基因的DNA片段和质粒具有相同的黏性末端，便于构建（连接）成基因表达载体（合理答案给分） T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上 （4） 抗虫的接种实验

【解析】（1）Bt杀虫蛋白基因来自苏云金杆菌，是一种原核基因，可利用苏云金杆菌细胞内合成的mRNA通过逆转录形成单链DNA片段，从而获得目的基因。在生物体外采用PCR技术扩增目的基因，扩增时需要加入引物，其引物是能与目的基因配对的一段脱氧核苷酸序列。

（3）构建基因表达载体时，为了使目的基因的DNA片段和质粒具有相同的黏性末端，便于构建（连接）成基因表达载体，通常用同种限制性核苷酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒。利用Ti质粒具有T-DNA，可携带目的基因转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上，故常用农杆菌转化法将基因表达载体导入植物细胞。

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