基因工程和蛋白质工程
1.基因工程的基本工具
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2.基因工程的操作步骤 (1)获取目的基因的三种方法 ①从基因文库中获取
②
③化学法人工合成:通过DNA合成仪利用化学方法直接合成。 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建 ①基因表达载体的组成
②构建过程
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(3)将目的基因导入受体细胞的“三种类型”
①导入植物细胞——农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法(本法针对单子叶植物) ②导入动物细胞——显微注射法 ③导入微生物(细菌)——转化法 (4)目的基因的检测与鉴定的方法
①检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原—抗体杂交技术。 ④个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。 3.蛋白质工程 (1)流程图
写出流程图中字母代表的含义:
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A.转录,B.翻译,C.分子设计,D.多肽链,E.预期功能。
(2)基本途径:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
(3)对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现。
1.(2019·全国卷Ⅰ)基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。 (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括________和________。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的________。
巩固提升见P184考向2第1题(1)
(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是
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