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HIV初筛实验室SOP

来源:用户分享 时间:2025/11/20 0:20:56 本文由loading 分享 下载这篇文档手机版
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完毕,脱去手套后立即洗手,必要时进行手消毒。

3、在诊疗、护理操作过程中,有可能发生病人血液、体液飞溅到医务人员的面部时,医务人员应当戴手套、具有防渗透性能的口罩、防护眼镜;有可能发生血液、体液大面积飞溅或者有可能污染医务人员的身体时,还应当穿戴具有防渗性能的隔离衣或者围裙。

4、医务人员手部皮肤发生破损,在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操作时必须戴双层手套。

5、医务人员在进行侵袭性诊疗、护理操作过程中,要保证充足的阳光,并特别注意防止被针头、缝合针、刀片等锐器刺伤或划伤。

6、使用后的锐器应当直接放入耐刺、防渗漏的利器盒,或者利用针头处理设备进行安全处置,也可以使用具有安全性能的注射器、输液器等医用锐器,以防刺伤。

7、禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。禁止用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。

三、艾滋病病毒暴露后的预防处理 (一)紧急局部处理:

1、用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤,用生理盐水冲洗粘膜。

2、如有伤口,应当在伤口旁端轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,用再肥皂液和流动清水冲洗;禁止进行伤口的局部挤压。

3、受伤部位的伤口冲洗后,应当用消毒液,如70%乙醇或者0.5%碘伏进行消毒,并包扎伤口;被暴露的粘膜,应当反复用生理盐水冲洗干净。 (二)暴露后的报告及处理程序

1、医护人员发生艾滋病病毒职业暴露后,要立即上报医院领导(具体由医院确定院内程序,注意给暴露者保密)。及时报告天山区疾控中心,组织专家对暴露的级别和暴露源的病毒载量水平进行评估和确定。

2、医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后,区疾控中心应当会同相关医疗卫生单位对其进行随访和咨询。随访和咨询的内容包括:在暴露后第4周、第8周、第12周及6个月时对艾滋病病毒抗体进行检测,对服用药物的毒性进行监控处理,观察和记录艾滋病病毒感染的早期症状等。不进行暴露后预防用药者,也要定期

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检测艾滋病病毒抗体,检测时间同上。

3、在对艾滋病病毒职业暴露事件的整个处理过程中,必须始终做好保密工作。凡涉及暴露者个人的相关资料,不得向无关单位和人员泄露。 四、暴露后预防性用药

对发生艾滋病病毒职业暴露的医务人员应当根据暴露源病毒载量水平实施

预防性用药方案。

预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早开始,最好在4小时内实

施,最迟不得超过24小时;即使超过24小时,也应当实施预防性用药。

暴露后预防性用药的推荐方案:

1、基本用药程序:两种逆转录酶抑制剂,使用常规治疗剂量,连续服用28天。如双汰芝(AZT与3TC联合制剂) 300 mg/次,每日2次,用药时间为连续服用28天。或参考抗病毒治疗指导方案。本程序适用于轻度低危暴露。 2、强化用药程序:

基本用药程序加一种蛋白酶抑制剂,如佳息患或利托那韦。均使用常规治疗剂量,连续服用28天。本程序适用于严重暴露。

鉴于医务人员暴露后的感染率很低而用药的毒、副作用很大,所以应严格掌握用药的指征。

第二部分 标准操作规程

第二章 样品采集与处理

一、 样本采集

1、接患者申请单后,填写血样采集记录,记录包括患者日期、姓名、年龄、门诊号、采集人签名等。

2、用带分离胶的负压管采集一定量的静脉血,颠倒混匀5~6次,室温下自然放置半小时,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min。 二、 标本采集注意事项

1、样本采集严格按静脉穿刺规范操作。

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2、采集样本时应注意安全,直接接触HIV感染/艾滋病病人血液的操作,应戴双层手套,里层是PE手套,外层为乳胶手套。 三、 样本保存

在一周内检测的样本,可存放于2~8℃;在一周以后检测的样本,须存放于-20℃。

四、 样本运送

1、样本运送一般为血清或血浆,不运送全血。

2、容器要求:①血清应置于带盖的1.5ml离心管内,管外应有明显的标记,姓名与门诊号要清晰;②在离心周围应垫有可缓冲吸水材料,以免破碎;③随样品应附有送检单,送检单应与样本分开放置。④外层容器要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器。 3、天气过热,需采用干冰或冰壶冷藏运输。

第二章 标准操作程序

一、北京金豪

【方法】双抗原夹心酶联免疫法

【原理】本试剂盒采用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶、采用双抗原夹心法捕获人血清、血浆标本中的HIV(1+2)抗体。 【HIV筛查试验操作程序】 (一) 试验前准备:

1、试验开始前将试剂和样品放置于室温(18~23℃)半小时。 2、换隔离衣,戴好帽子、口罩、双层手套。

3、缓冲液配制:用蒸馏水1:25倍稀释,现用现配。或液体内有结晶,应放置在37℃直至溶解。 (二) 试验操作:

1、装好所需使用数目的孔条。设空白对照孔2孔,2个阴性对照孔,2个HIV-1阳性对照孔。取阳性对照和阴性对照分别充分混匀各50ul加入对照孔中,空白

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对照孔只加样品稀释液。

2、每检测孔加入样品稀释液50ul,待检样品50ul,可振摇5~10S。 3、覆盖粘胶纸,37±2℃孵育30min。

4、置洗板机上洗涤5遍(用洗液将反映孔完全加满,静置30S,共洗涤5遍,洗完后孔上方及底部不应残存液体,禁止在滤纸上拍干)。

5、每孔加酶结合物100ul,取新粘胶纸覆盖反应板,37±2℃孵育30min。 6、同步骤4。

7、每孔加入底物缓冲液50ul,TMB50ul,混匀,不必覆盖粘胶纸,37±2℃孵育10min。

8、每孔加入50ul 1M硫酸终止反应,充分混匀。

9、在2h内置于酶标仪读数,单波长450nm,或双波长450/630nm测OD值。 (三)试验结果 1、NC≤0.02

2、Cut off值=0.1+NC=0.12

3、标本OD值小于Cut off为阴性,大于或等于Cut off为阳性

(四)报告:对呈阴性反应的样品,可由实施检测的实验室出具HIV抗体阴性报告;对呈阳性反应的样品,须进行复检,不能出阳性报告。

二、上海科华生物

【方法】双抗原夹心酶联免疫法

【原理】本试剂盒采用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶、采用双抗原夹心法捕获人血清、血浆标本中的HIV(1+2)抗体。

【HIV筛查试验操作程序】 (一) 试验前准备:

1. 试验开始前将试剂和样品放置于室温(18~23℃)半小时。 2. 换隔离衣,戴好帽子、口罩、双层手套。

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