RT-PCR检测人膀胱上皮细胞双功能氧化酶表达

RT-PCR检测人膀胱上皮细胞双功能氧化酶表达＊

耿会珍 刘明岩 赵丽君 刘珍 刘燕翔 黄宁 王伯瑶 吴琦△

【摘 要】摘 要目的：检测人膀胱上皮细胞(T24细胞)是否表达双功能氧化酶(Duox-1、Duox-2),并观察炎症细胞因子及佛波酯(PM A)对基因表达水平的影响。方法：体外培养人膀胱上皮(T24)细胞,经佛波酯(PMA)、炎症细胞因子(TNF-α及IFN-γ)刺激后提取细胞总RNA,采用半定量RT-PCR方法观察细胞Duox-1,Duox-2 mRNA表达水平。结果：Duox-1,Duox-2 mRNA在T24细胞中组成性表达,在佛波酯(PMA)、TNF-α及IFN-γ作用下,Duox-2基因表达水平明显增加,而Duox-1基因表达水平无明显变化。结论：双功能氧化酶Duox-1和Duox-2基因在膀胱上皮细胞表达,并受炎症刺激的影响,其在膀胱上皮细胞中的生理功能值得深入研究。 【期刊名称】四川生理科学杂志 【年(卷),期】2010(032)001 【总页数】3

【关键词】膀胱上皮细胞;双功能氧化酶;基因表达

吞噬细胞NADPH氧化酶被激活后,细胞发生呼吸爆发,产生大量活性氧(ROS),成为细胞杀灭微生物的重要成分。2000年以后,在非吞噬细胞发现了NADPH氧化酶的同源物家族,被命名为 NOX(NADPH oxidase)家族。人类 NOX家族共有 7 个成员,即 NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5、Duox-1和Duox-2[1-3]。NOX家族广泛表达于机体的组织器官,其生物学功能成为研究的热点。双功能氧化酶(Duox-1和Duox-2)最初在甲状腺中发现,它们除了具有NOX的C端结构域外,还有一个N端过氧化物酶样胞外域,故称为双功能氧化酶。近年