HPLC流动相的缓冲液之欧阳治创编

欧阳治创编 2021.03.10 欧阳治

创编 2021.03.10

HPLC流动相的缓冲液缓冲液流动相可以根据下面的操作步骤配制：将缓冲液药品溶解在水中制成缓冲液（溶液A）。用pH计确定或调节溶液A的pH。将一定体积（如200ml）的有机溶剂B与由步骤2配制的溶液A（如800ml）混合，制成最终流动相（此处的有机相为20%）。检查最终流动相的pH（此处为选项）。由于测定含有有机调节剂的流动相

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pH计发生漂移，使其测定pH不很可靠，所以上面的步骤4一般只有在考察误差的主要来源时采用，大多数实验室皆略去此步骤。步骤1一般是将配制缓冲液所用的两种试剂（A1和A2）分别按计算量先溶解在水中制成水溶液，然后再将这两种溶液按一定的比例混合得到预期pH的溶液A。若在此步骤2中调节pH，则可以采用溶剂A滴定溶剂B，也可反过来滴

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定，并通过pH计测量得到所需pH的最终缓冲溶液。在大多数实验室中，pH的测量精度通常不会达到±0.05—0.1个pH单位，这会显著影响一些样品的分离。当HPLC方法对pH非常敏感时，步骤2只能大致确定pH值。 将准确称重的缓冲液配制试剂与精确体积的脱气蒸馏水混合，使其成为均一的溶液（不进一步调整pH），如此配得得缓冲溶液得pH可以控

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