课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
【学习目标】
1、通过尝试PCR技术的基本操作，使学生体验PCR这一常规的分子生物学试验方法。
2、通过观看PCR相关视频,结合教师讲解,能够理解PCR的原理，讨论PCR的应用。
【学习重点难点】
PCR的原理和PCR的基本操作 【自主学习】 基础知识 1.PCR原理 填写下列表格
参与的组分 解旋酶 DNA母链 在DNA复制中的作用 合成子链的原料 DNA聚合酶 引物 DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为 ，而磷酸基团的末端称为 ___ 。DNA聚合酶不能 开始合成DNA，而只能 ，因此，DNA复制需要引物。DNA的合成方向总是 。
在DNA的复制过程中，复制的前提是 。在体外可通过控制 来实现。在 的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为 。PCR利用了DNA的 原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。由于PCR过程的温度高，导致DNA聚合酶失活，后来 的DNA聚合酶的发现和应用，大大增加了PCR的效率。
PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供：_______________，___________，___________，___________，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
2.PCR的反应过程
PCR一般要经历 循环，每次循环可以分为_________、___________和 三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由 延伸而成的DNA单链会与 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能 ，使这段固定长度的序列成指数扩增。
3.实验操作
在实验室中，做PCR通常使用 ，它是一种薄壁塑料管。具体操作时，用微量移液器，按PCR反应体系的配方在 中依次加入各组分，再参照下表的设置设计好PCR仪的循环程序即可。
4.操作提示
为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的__________、_________、___________以及蒸馏水等在使用前必须进行 。PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在 储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应成分时，移液管上的枪头要 。
【巩固提高】 一、选择题
1.DNA分子复制时，解旋的两条链中（ ） A.仅一条作为复制模板
B.两条链作为模板并复制出两个不同的DNA分子 C.两条链作为模板并复制出两个相同的DNA分子
D.两条链作为模板，各自合成一条子链，然后两条母链重新结合为原来的双螺旋分子，两条新链结合成一个全新的DNA分子
2.下列关于DNA复制过程的正确顺序是（ ）
①互补碱基对之间氢键断裂②互补碱基对之间形成氢键③DNA分子在解旋酶的作用下解旋④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对⑤子链与母链盘旋成双螺旋状结构
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