选修一 专题二
[限时45分钟；满分100分]
一、选择题(每小题5分，满分20分)
1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是 A．操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸 C．灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解 D．将培养基冷却到约50 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板 解析 琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再灭菌。 答案 C
2．(2014·南通调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是
A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖 C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理 D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养
解析 ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源干上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使
每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。
答案 B
3．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是
A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法 C．若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源 D．使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落
解析 若④为对照实验，则④中培养基应含除苯酚外的其他碳源，⑤中以苯酚作为唯一碳源。
答案 C
4．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 解析 在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1
个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
答案 D
二、非选择题(共80分，每小题20分)
5．(2014·潍坊模拟)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答：(已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明)
(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为__________________，
目的是____________。
(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行______________，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和____________法，从图中看本实验采用的是____________(填“前者”或“后者”)。
(3)一段时间后，培养基出现无透明带和有透明带两种菌落，我们筛选的目的菌是________________菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源于____________________________________。
(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？______________________________________________________。
答案 (1)选择培养 初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度 (2)梯度稀释 稀释涂布平板 后者 (3)有透明带 莠去津 (4)配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在相同条件下培养
6．(2014·南京模拟)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力
强的酿酒酵母。请分析回答下列问题：
(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是__________________________________。
(2)取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。
图乙是经过图甲过程A纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是________________(用编号表示)。研究者在图甲过程C的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是______________________。
(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以____________为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
(4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA，利用PCR技术大量扩增获得目的基因。若将1个目的基因分子复制10次，则需要在缓冲液中至少加入__________个引物。将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏____________能力的酿酒酵母作为受体菌。
(5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含______________的培养基中进行酒精发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能__________________，即说明所需菌株培育成功。
解析 (1)待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖的冷
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