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寄生虫粪便检查法论文 - 图文

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粪便1g,加适量(约10ml)汞碘醛液,充分调匀,用2层脱脂纱布过滤,再加入乙醚4ml,摇2分钟,离心(2000rpm/min)1~2分钟,即分成乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物4层。吸弃上面3层,取沉渣镜检。 3.1.4醛醚沉淀法

置粪便1~2g于小容器内,加水10~20ml调匀,将粪便混悬液经2层纱布(或100目金属筛网)过滤,离心(2000rpm/min)2分钟;倒去上层粪液,保留沉渣,加水10ml混匀,离心2分钟;倒去上液,加10%甲醛7ml。5分钟后加乙醚3ml,塞紧管口并充分摇匀,取下管口塞,离心2分钟,即可见管内自下而上分为4层。取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊,可加卢戈氏液染色,加盖片镜检。 3.2 浮聚法

利用比重较大的液体,使原虫包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有两种:

3.2.1饱和盐水浮聚法

此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯(高3.5cm,直径约2cm的圆形直筒瓶)中,加入少量饱和盐水调匀,再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口,但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载玻片,静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转,镜检(图3)。 图3 饱和盐水浮聚法

饱和盐水配制:将食盐徐徐加入盛有沸水的容器内,不断搅动,直至食盐不再溶解为止。

3.2.2硫酸锌离心浮聚法

此法可用于检查原虫包囊,球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g,加10~15倍的水,充分搅碎,按离心沉淀法过滤,反复离心3~4次,至水清为止,最后倒去上液,在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液(33%的溶液),调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处,离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上,加碘液一滴,镜检。

3.2.3蔗糖离心浮聚法

此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g,加水15~20ml,以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心5~10分钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水320ml,石炭酸6.5ml)再离心,然后如同饱和盐水浮聚法,取其表液膜镜检(高倍或油镜)。卵囊透明无色,囊壁光滑,内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常紧贴于盖片之下,但1小时后卵囊脱水变形不易辨认,故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。

常见蠕虫卵、包囊的比重如表1。 表1 蠕虫卵及包囊的比重 虫卵或包囊 华支睾吸虫卵 姜片吸虫卵 肝片形吸虫卵 日本血吸虫卵 带绦虫卵 微小膜壳绦虫卵 钩虫卵 鞭虫卵

比 重 1.170~1.190 1.190 1.200 1.200 1.140 1.050 1.055~1.080 1.150

蛲虫卵 受精蛔虫卵 未受精蛔虫卵 毛圆线虫卵 溶组织内阿米巴包囊 结肠内阿米巴包囊 微小内蜒阿米巴包囊 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 4 毛蚴孵化法

1.105~1.115 1.110~1.130 1.210~1.230 1.115~1.130 1.060~1.070 1.070 1.065~1.070 1.040~1.060

依据血吸虫卵内的毛蚴在适宜温度的清水中,短时间内可孵出的特性而设计的方法,适用于星期血吸虫病患者的粪便检查。取粪便约30g,先经重力沉淀法浓集处理,将粪便沉渣倒入三角烧瓶内,加清水(城市中需用去氯水)至瓶口,在20~30℃的条件下经4~6小时后肉眼或放大镜观察结果。如见水面下有白色点状物作直线来往游动,即是毛蚴。必要时也可用吸管将毛蚴吸出镜检。如无毛蚴,每隔4~6小时(24小时内)观察一次。气温高时,毛蚴可在短时间内孵出,因此在夏季要用1.2%食盐水或冰水冲洗粪便,最后一次才改用室温清水(图2)。 毛蚴促孵法:将沉淀法处理后的粪便沉渣置于三角瓶内,不加水,或将粪渣置于吸水纸上,再放在20~30℃温箱中过液。检查时,加清水,2小时后就可见到孵出的毛蚴。此法毛蚴孵出时间较一致,数量也较多。 5 肛门拭子检查法

适用于在肛周产卵(蛲虫),或常在肛门附近发现虫卵(带绦虫)的虫卵检查法。 1.棉签拭子法:先将棉签浸泡在生理盐水中,取出时挤去过多的盐水,在肛门周围擦拭,随后将棉签放入盛有饱和盐水的试管中,用力搅动,迅速提起棉签,在试管内壁挤干盐水后充去,再加饱和盐水至管口处,覆盖一载玻片,务使其接触液面,5分钟后取载玻片镜检。也可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试管中,经充分浸泡,取出,在试管内壁挤去水分后弃去。试管静置10分钟,或经离心后,倒去上液,取沉渣镜检。

2.透明胶纸法:用长约6cm,宽约2cm的透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤,取下胶纸,将有胶面平贴玻片上,镜检。 6 钩蚴培养法

根据钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫的原理设计的方法。如冷开水约1ml于洁净试管内(1×10cm),将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T字型纸条,用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪便约0.2~0.4g,均匀地涂抹在紧竖条纸条的上部2/3处,再将纸条插入试管,下端浸泡在水中,以粪便不接触水面为度。在20~30℃条件下培养。培养期间每天沿管壁补充冷开水,以保持水面位置。3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩蚴在水中常作蛇形游动,虫体透明。如未发现钩蚴,应继续培养观察至第5天。气温太低时可将培养管放入温水(30℃左右)中数分钟后,再行检查(图4)。 图4 钩蚴培养法

此法亦可用于分离人体肠道内各种阿米巴滋养体及人毛滴虫滋养体,且能提高检出率。但是,每管粪便量应为1.0g;适宜温度为25~30℃;培养时间为2~4天。临床上为了及时报告致病原虫,可于培养48小时后镜检。检查肠道各种原虫,仍应结合碘液涂片法以检出原虫包囊。

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