一、名词解释
DNA克隆 将某种DNA片段与DNA载体连接成重组DNA，导入细胞进行复制，并随细胞分裂而扩增，最终获得该DNA片段的大量拷贝。 质粒 细菌染色体外的小型环状双链DNA分子 二、简答题
① 简述基因克隆的基本原理。
将某种DNA片段与DNA载体连接成重组DNA，导入细胞进行复制，并随细胞分裂而扩增，最终获得该DNA片段的大量拷贝。
② 何谓目的基因？写出其主要来源或途径。
既是指有待克隆的DNA，又是指有待研究或应用的克隆产物。 从组织细胞提取 逆转录合成 PCR扩增 化学合成
③ 简述作为基因克隆的载体有哪些特点，试举例说明。 能自主复制；
具有两个以上的遗传标记物，便于重组体的筛选和鉴定； 有克隆位点（外源DNA插入点），常具有多个单一酶切位点，称为多克隆位点； 分子量小，以容纳较大的外源DNA。
简述乳糖操纵子正、负调节机制。 无乳糖有葡萄糖，不转录 有乳糖有葡萄糖，低转录 有乳糖无葡萄糖，高转录
转录水平调控的基本要素有哪些。 RNA聚合酶、调控序列和调节蛋白
试举例说明基因表达的特异性。
基因表达的时间特异性 甲胎蛋白基因在胎儿肝细胞表达，合成大量甲胎蛋白，自出生至成年后该基因基本沉默
基因表达的空间特异性 甲胎蛋白基因只在肝细胞内表达
基因表达的条件特异性 在乳糖充足而葡萄糖缺乏时大肠杆菌乳糖操纵子高水平表达 三、论述题
在有葡萄糖存在时，细菌是不利用乳糖的；当葡萄糖耗尽后，细菌才利用乳糖。试用乳糖操纵子解释其机制。
试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同。 原核生物转录水平调控的特点
σ因子决定RNA聚合酶识别的特异性
多顺反子mRNA
操纵子是主要调节机制 转录和翻译紧密偶联
阻遏蛋白介导的负性调节为主 转录起始是调节的关键
真核生物基因表达调节特点
转录水平为调节的关键环节 转录以正性调节为主
转录调控中需多种转录因子，始终体现了蛋白与蛋白、蛋白与DNA间的作用 单顺反子，一种蛋白的多个亚基涉及多个基因的协调表达调控 染色体结构影响基因表达
转录与翻译分开进行，且为断裂基因，增加基因表达调控的层次
名称解释：
1. 密码子 mRNA编码区从5’端向3’端每三个相邻碱基一组连续分组，每一组碱基构成一个遗传密码
2. 核蛋白体循环 一个核糖体在完成一轮翻译之后解离成亚基，可以在mRNA5’端重新组装，开始新一轮翻译，形成核糖体循环
问答题：
1. 简述遗传密码的基本特点。 方向性 连续性 简并性 通用性
2. 简述3种RNA在蛋白质合成中的作用。 mRNA从DNA传递遗传信息
tRNA既是氨基酸转运工具又是读码器 rRNA构成核糖体合成蛋白质
3. 简述原核生物肽链合成的主要步骤。 翻译起始
翻译延长 进位 成肽 易位 翻译终止 多核糖体循环 。
名称解释：
转录 是遗传信息由DNA向RNA传递的过程，即一股DNA的碱基序列按照碱基互补配对原则指导RNA聚合酶催化合成与之序列互补RNA的过程。 1. 不对称转录
①在DNA双链分子上一股链可转录，另一股链不转录； ②模板链并非永远在同一单链上。 2. 断裂基因
4. 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。
4. 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 5. mRNA编辑 6. 剪接体 由核内小核糖体核蛋白与数百种其他剪接因子组装于Ⅲ类内含子上形成的复合体 问答题：
1. 简述原核生物和真核生物转录的 不同。
原核为多顺反子，含多个结构基因 真核为单顺反子
原核转录酶只一种，直接起始转录
真核有三种转录酶，需蛋白因子的帮助 两者启动子结构不同 原核转录翻译同步进行 真核转录翻译非同步 原核初级产物具活性 真核加工后才有活性
2. 简述复制和转录的异同点。 相同点
酶促核苷酸聚合过程 DNA为模板
依赖DNA的聚合酶
核苷酸间形成磷酸二酯键 方向5’ → 3’ 遵守碱基配对规律 不同点
复制 转录
模板 两股链均复制 模板链转录（不对称转录） 原理 dNTP NTPA
酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶
产物 子代双链DNA（半保留复制） mRNA,tRNA,rRNA 配对 A-T G-C A-U T-A G-C 引物 需要 不需要
名称解释：
1. 半保留复制 DNA复制时，两股亲代DNA链解开，分别作为模板，按照碱基互补配对原则指导合成新的互补链，最后形成与亲代DNA相同的两个子代DNA分子，每个子代DNA分子都含一股亲代DNA链和一股新生DNA链 2. 冈崎片段 随从链复制中的不连续片段
3. 领头链 顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的, 4. 随从链 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长,呈不连续复制 5. 端粒 真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。
6. 逆转录 以RNA为模板，以dNTP为原料，在逆转录酶的催化
下合成DNA的过程 问答题：
1. 简述原核生物复制起始的过程及参 与酶。
亲代DNA从复制起点解链、解旋，形成复制叉 DNA聚合酶 DNA解旋酶 DNA拓扑异构酶 引物酶
DNA连接酶
3. 简述DNA复制保真性的机制。 遵守严格的碱基配对规律
聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能 复制出错时有即时的校读功能
3. 简述DNA损伤的类型及修复类型。
错配 插入和缺失 重排 共价交联 碱基丢失 主链断裂 错配修复 直接修复 切除修复 重组修复 易错修复
名称解释：
1. 基因 基因是储存遗传信息的遗传单位，是为生物活性产物编码的DNA功能片段，这些产物主要是蛋白质或各种RNA。
2. 基因组 一种生物所含的一套遗传物质 3. 断裂基因 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而
成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质， 问答题：
1. 简述真核生物与原核生物基因组的不 同点。
原核生物基因组的结构特征
1. 常为单一闭环双链DNA分子，只有一个复制起点，形成操纵子结构 2. 结构基因的编码是连续的
3. 结构基因之间的编码序列不重叠
4. 结构基因多为单拷贝基因（编码rRNA基因除外）
5. 结构基因在基因组所占比例（50%）远大于真核基因组，小于病毒基因组 6. 非编码序列主要为调控序列 7. 存在可移动序列
真核生物基因组的结构特征
基因组庞大，为二倍体，编码基因所占比例较少（10%） 含大量重复序列 断裂基因 单顺反子
线性分子，以染色质结构存在，有多个复制起点 存在线粒体DNA
存在多基因家族和假基因
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