第二次洗涤的目的是除去______________。
(4)从反应柱下端接取少量流出液进行KI－I 2颜色测试，结果未呈现红色。下列有关此现象的解释错误的是：________。 A.反应柱中没有α－淀粉酶被固定 B.流速过快淀粉未被水解 C.接取的流出液是蒸馏水 D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖
解析 单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。可以通过划线分离法和涂布分离法实现。菌种在液体培养基中进行扩大培养。固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种不溶于水的介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。用吸附法将α－淀粉酶固定在石英砂上，装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中，用10倍体积的蒸馏水洗涤注射器，以除去未吸附的α－淀粉酶，实验结束后，用10倍体积的蒸馏水洗涤反应柱，以除去反应物及产物。若从反应柱下端接取少量流出液进行KI－I 2颜色测试，结果未呈现红色，说明反应几乎没有进行，A、B、C正确，而流速过慢淀粉被水解成糊精，颜色呈红色，D错误。
答案 (1)单菌落分离 划线分离 (稀释)涂布分离 液体 (2)非水溶性 (3)10倍 残留的淀粉溶液及产物 (4)D 3.请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：
(1)果胶是植物细胞壁的重要组成成分，制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成半乳糖醛酸和__________________等物质，可得到比较澄清的果汁。
(2)实验中先制取苹果匀浆，再将适量且浓度适宜的__________加入匀浆，并在________下搅拌20～30 min。若再通过________处理可以进一步提高果汁的出汁率、澄清度。由于果胶不溶于乙醇，故可用95%乙醇对果汁中果胶含量进行初步检测。
(3)果胶酶可通过培养______________(微生物)来生产，果汁的出汁率、澄清度与酶的活性高低呈正相关。
(4)为提高果胶酶的利用率和果汁的纯度，可将果胶酶制成____________用于生产，这种新型酶制剂除上述优点外，还有____________________________的优点。
解析 (1)果胶酶可以将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。(2)制取果汁应先制水果匀浆，再向水果匀浆中加入果胶酶，并在适宜温度下反应足够长时间，将果汁中的果胶完全水解。在此基础上通过加热使果胶发生凝聚，可以进一步提高果汁的出汁率、澄清度。(3)果胶酶可通过培养黑曲霉和苹果青霉来生产。(4)将果胶酶制成固定化酶，可以提高果胶酶的利用率和果汁的纯度，
体现了固定化酶可以重复利用和容易从产物中分离的优点，此外，固定化酶还有可以使酶的稳定性提高的优点。
答案 (1)半乳糖醛酸甲酯 (2)果胶酶溶液 适宜温度 加热 (3)黑曲霉和苹果青霉 (4)固定化酶 酶的稳定性提高(或不溶于水)
4.某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
请据图回答：
(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________。
(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________。
(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。
解析 (1)KMnO4有杀菌消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。果汁中因含有果胶等而使苹果汁浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。固定化酶技术是将酶固定在固定化柱的载体上，固定化柱内填充的石英砂可以起到很好的吸附作用。酶被固定后用蒸馏水冲洗是为了除去未被固定的游离的酶。(2)具体操作时，先将阀1打开，将提取的果胶酶固定在固定化柱中，再将阀门1关闭，阀2打开，使苹果汁进入固定化柱，与酶接触，固定的果胶酶就能将果汁中的果胶分解，而果胶酶不流失。果汁中的果胶不溶于乙醇中会形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶，如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，为使果胶完全水解，应控制阀门2的流量，调慢果汁流速。(3)酶被固定化后，便于与反应物和产物分离，可重复利用，提高酶的利用率。
答案 (1)消毒 果胶酶 吸附 未被固定的酶等 (2)A、B 阀1 乙醇 浑浊(沉淀) 慢 (3)重复
5.(2018·宁波九校联考)利用紫薯制酒可以提高其经济附加值。请回答下列问题：
(1)在工厂化生产时，为提高紫甘薯的利用率，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自____________等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成______________。
(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解为__________。 A.半乳糖醛酸和葡萄糖 B.半乳糖和果糖 C.麦芽糖
D.半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯
(3)在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和__________。 (4)下图表示发酵液温度对酒精浓度的影响。据图判断，最佳温度是__________。
解析 果胶酶可来自黑曲霉或苹果青霉等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成固定化酶。果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成，因此果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解为半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和蔗糖。分析曲线图可知，温度为28 ℃时，随时间的推移，和其他温度对比其酒精浓度最高，表明发酵的最佳温度是28 ℃。 答案 (1)黑曲霉或苹果青霉 固定化酶 (2)D (3)蔗糖 (4)28 ℃ 6.果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，常用于果汁的生产。
(1)果胶酶用于果汁生产，是因为它能分解果胶，可解决果肉出汁率低和________等问题。 (2)果胶由________和________组成。
(3)若要检测苹果汁中是否还含有果胶，可取一定量的果汁与________混合，若出现________现象，说明果胶还没有被完全分解。
(4)下图为某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是________。
A.实验中所用的固定化果胶酶可由某些物质吸附，吸附后的酶可永久使用 B.为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌 C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行 D.固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
(5)固定化酶技术是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使酶能与________接触，又能与________分离。
(6)在“α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”这一实验中，α－淀粉酶固定在石英砂上，使用了下图中的________。
解析 果胶酶用于果汁生产可以提高果汁出汁率和澄清度。果胶由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯构成。果胶不溶于乙醇，当果胶与乙醇混合时会出现浑浊。固定化果胶酶可以重复使用，但不能永久使用。图示装置是固定化酶柱不能瞬间高温灭菌，否则酶失活后不能重复使用了。适当减少苹果汁流出的速率，可以保证反应充分进行。固定化酶可以做到既能与底物接触发生反应，又易与产物分离，提高产物纯度。α－淀粉酶固定在石英砂上，使用了吸附法，图中③表示吸附法。 答案 (1)果汁浑浊 (2)半乳糖醛酸 半乳糖醛酸甲酯 (3)乙醇 浑浊 (4)C (5)底物(反应物) 产物 (6)③
7.红枣具有丰富的营养和保健价值，利用红枣酿造的酒可提高其附加值，也越来越被人们青睐，请回答：
(1)为提高红枣的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自______________等微生物，果胶酶可将红枣匀浆中的果胶水解成____________。 (2)若要探究果胶酶的最适用量，下列叙述错误的是________。 A.在等量的果泥中加入不同量的果胶酶
B.调节pH，使各组中的pH处于相同且适宜状态 C.用玻璃棒搅拌加酶的果泥，搅拌时间应相同
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