学业达标测评(一) 大肠杆菌的培养和分离
1．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用( ) A．固体培养基 B．液体培养基 C．加青霉素的培养基 D．加入高浓度食盐的培养基
【解析】 分离微生物应使用固体培养基。 【答案】 A
2．涂布平板操作需要用到( ) A．接种环、滴管、酒精灯 B．接种环、移液管、酒精灯 C．涂布器、移液管、酒精灯 D．涂布器、接种环、酒精灯
【解析】 涂布平板操作过程中不需要接种环。 【答案】 C
3．采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌( )
A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、接种环、吸管、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手
【解析】 干热灭菌主要对玻璃器皿进行灭菌，紫外线主要对接种室和接种箱进行空气和表面灭菌。
【答案】 B
4．下列操作错误的是( ) A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源 C．实验室用紫外线进行消毒
D．玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的
【解析】 玻璃器皿应用干热无菌箱在160～170 ℃加热1～2 h才能达到无菌目的。 【答案】 D
5．在涂布平板操作时错误的是( ) A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面
C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用 D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀
【解析】 涂布平板所用涂布器是玻璃器皿，不能在酒精灯火焰上灼烧，否则会变形，正确方法是沾取少量酒精，引燃。
【答案】 A
6．利用涂布分离法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是( )
A．培养基制备过程中被杂菌污染 B．接种过程中，无菌操作不符合要求 C．系列稀释时，无菌操作不符合要求 D．由大肠杆菌的种类不同造成的
【解析】 大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。
【答案】 D
7．下列与大肠杆菌及其培养与分离的相关叙述正确的是( ) A．大肠杆菌是革兰氏阳性菌 B．大肠杆菌的代谢类型是异养需氧型 C．可用LB固体平面培养基扩大培养大肠杆菌 D．进行平板划线分离时，接种环只需蘸菌液一次
【解析】 大肠杆菌是革兰氏阴性菌，其代谢类型为异养兼性厌氧型，扩大培养大肠杆菌宜使用LB液体培养基，LB固体平面培养基可用于划线分离，进行划线分离时，为达到分离目的，获得单菌落，接种环只需蘸取菌液一次，故只有D选项所述正确。
【答案】 D
8．请回答微生物培养的有关问题：
(1)人们按照微生物对营养物质的不同需要，配制出供其生长繁殖的营养物质称培养基。培养基之所以有________、________和半固体培养基等三种，主要是培养基中所添加的________含量不同。
(2)微生物个体是肉眼看不见的，但固体培养基上的微生物的________是可见的，该结构的特征常常是鉴定菌种的主要依据之一。
(3)微生物的营养包括碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。培养乳酸杆菌时，在培养基中所添加的维生素属于________；在培养基中添加酸或碱或缓冲溶液的作用是__________________________________________________。
(4)培养微生物的操作必须实行无菌操作，以防止____________的入侵等作用。无菌操作主要包括________和灭菌；前者不能杀死芽孢和孢子，后者能杀死芽孢和孢子。
(5)微生物接种的方法很多，最常用的是________和______________。 【答案】 (1)固体培养基 液体培养基 琼脂(凝固剂) (2)菌落
(3)生长因子 调节培养基的pH(酸碱度) (4)外来杂菌 消毒
(5)平板划线法 稀释涂布平板法
9．从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养耐盐菌的菌样应从____________中采集，培养厌氧菌的菌样应从________中采集。
(2)富集培养指创设仅适应于该微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分离微生物在群落中的数量大大增加，从而达到从自然界中分离到所需特定微生物的培养方法。对耐盐菌富集培养的培养基应是______的选择培养基；对高温淀粉酶的富集培养应选择__________________的选择培养基，并在________条件下培养。
(3)实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的______________等物质发生________。________灭菌法是微生物研究和教学中应用最广、效果最好的灭菌法。
(4)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是____________，获得图B效果的接种方法是________。 【答案】 (1)高盐环境 无氧环境 (2)加盐 以淀粉为唯一碳源 高温 (3)蛋白质和核酸 变性 高压蒸汽 (4)(稀释)涂布分离法 划线分离法
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