西 南 大 学 课 程 考 核 雨蒙后
一、 名词解释（共5题，4分/题，共20分） 1.順式和反式作用元件 顺式作用元件(cis-acting element)存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。 顺式作用元件是指与结构基因串联的特定DNA序列，是转录因子的结合位点，它们通过与转录因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率。
反式作用因子(trans-acting factor)是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 ————————————————————————————————————————————————————— 学号 密2．增强子 增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5’端，也可位于基因的3’端，有的还可位于基因的内含子中。增强子的效应很明显，一般能使基因转录频率增加10～200倍，有的甚至可以高达上千倍。例如，人珠蛋白基因的表达水平在巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)增强子作用下可提高600～1 000倍。增强子的作用同增强子的取向(5’一3’或3’一5’)无关，甚至远离靶基因达几千kb也仍有增强作用。 班 年级 姓名 封3.PCR技术 PCR是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板，DNA聚合酶引物和4种dNTP的情况下，通过高温变性——低温退火——中温延伸这样反复循环的过程，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。 1) 高温变性：加热94℃，保温1分钟，使DAN双链分开形成单链。 2）低温退火;冷却到引物的Tm 以下，引物与DNA模板结合形成引物-模板复合物。 3) 中温延伸：温度上升72℃维持一段时间，以引物为固定的起点，以4种单核甘酸作为底物合成 新DAN链。 专业 学院 线 第 1 页 共6页
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4. 高通量测序技术
高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变，一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变，同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测序(deepsequencing)。 ————————————————————————————————————————————————————— 学号
5. 弱化子和弱化机制
弱化子定义：RNA合成终止时，起终止转录信号作用的那段DNA序列。
是在研究大肠杆菌的色氨酸操纵子表达弱化现象中发现的。在trp mRNA 5，端trp正基因的起始密码前有一个长162 bp的DNA序列称为前导区，其中第123～150位核苷酸如果缺失，trp基因的表达水平可提高6倍。研究发现，当mRNA开始合成后，除非培养基中完全不含色氨酸，否则转录总是在这个区域终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录。换句话说，当123～150位序列缺失后，trp基因转录就不会中途终止，于是基因表达水平提高。123～150位序列终止转录的作用是可以被调控的，如在培养基中完全不含色氨酸，则转录不会终止，这个区域被称为弱化子。弱化作用在原核生物中是相当普遍的，大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌中已陆续发现不少操纵子都有弱化现象。
密班 年级 姓名 封《添加》1.C值：通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量，以每细胞内的皮克数表示。 2.冈崎片段:是在DNA半不连续复制中产生的长度为1000~2000个碱基短的DNA片
段，能被连接形成一条完整的DNA链
专业 线二、判断题 （共8题，2分/题，共16分）
1、在原核生物复制子中用DNA聚合酶I完成DNA合成和缺口补平。（×） 2、RNA干扰包括siRNA和miRNA诱导的基因表达抑制。（√） 3、许多转录因子是组蛋白乙酰转移酶。（×）
4、siRNA和miRNA都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物。（√） 5、高纯度的DNA的OD值（A260/A280）值应介于1.6-1.8之间。 （√）
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6、一种tRNA对应一种氨基酸密码子。 （×）
7、DNA后随链复制过程中需要RNA引物，RNA引物的降解是通过RNaseH实现的。（×）
8、伴侣分子主要负责新生肽链的折叠和转运。 （×）
三、简答题（共5题， 8分/题，共40分）
1．描述DNA如何排列在染色体上以及该排列方式的生物学意义？
答：双螺旋排列
生物学意义：
（1）DNA分子是两条反向平行的互补双链结构，脱氧核糖和磷酸在外，碱基在内，垂直于螺旋轴。两链的碱基以氢键结合。互补配对方式：G=C，A=T.排列稳定。
（2）生物体遗传信息能够稳定保持并进行复制与传递，不断产生新的个体。
————————————————————————————————————————————————————— 学号 班 姓名 密封2．分子生物学中心法则的提出和发展
中心法则：在DNA结构提出之后，1957 年F.H.C.克里克最初提出的中心法则是： DNA→RNA→蛋白质它说明遗传信息在不同的大分子之间的转移都是单向的，不可逆的,只能从DNA 到RNA(转录)，从RNA 到蛋白质（翻译）。这两种形式的信息转移在所有生物的细胞中都得到了证实。1970 年H.M.特明和D.巴尔的摩在一些RNA 致癌病毒中发现它们在宿主细胞中的复制过程是先以病毒的RNA 分子为模板合成一个DNA 分子,再以DNA 分子为模板合成新的病毒RNA。前一个步骤被称为反向转录,是上述中心法则提出后的新的发现。因此克里克在1970 年重申了中心法则的重要性，提出了更为完整的图解形式。
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3．在 DNA 复制过程中，前导链和后随链是如何合成的？
答：以M13噬菌体为例。其基因组为单链正DNA。先以单链正DNA为模板合成负链，
形成复制型DNA。再把正链切开，在正链3'末端延伸，形成新的正链（前导链）。SSB蛋白从正链5'末端开始结合，使正链从5'末端与负链分开。正链延伸，形成连续的多拷贝的正链。然后正链酶切，形成单拷贝的单链正DNA。此例中没有后随链了。一些质粒则还有下文。酶切形成的单拷贝的单链正DNA，环化。在以此为模板，合成负链（即后随链）。大概就是先前导链，再后随链。
实际上，这里的后随链并不是像染色体上DNA后随链一样，一段一段合成，再连起来。DNA环化后，后随链也可一气呵成。
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4．核酶的结构特点和种类
核酶（ribozyme）是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。它的发现打破了酶是蛋白质的传统观念。
专业 线特点：与一般的反义RNA相比，核酶具有较稳定的空间结构，不易受到RNA酶的攻击。
更重要的是，核酶在切断mRNA后，又可从杂交链上解脱下来，重新结合和切割其它的mRNA分子。
种类：天然核酶可分为四类：(1)异体催化剪切型，如RNaseP；(2)自体催化的剪切型，
如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA；(3)第一组内含子自我剪接型，如四膜虫大核26SrRNA；(4)第二组内含子自我剪接型。利用反义技术研制的药物称反义药物。
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