Agilent1220 高效液相操作规程

Agilent1220 高效液相操作步骤

开机步骤 1 2 3 4 5 6 7 8 9

检查 开机 开阀 控制

查看电源是否正常；查看废液是否正常；放置流动相。 打开仪器电器，无先后顺序。

打开泵的清洗阀，逆时针为打开。切记！ 点击[仪器][仪器状态]；进入仪器控制页面。

工作站 打开电脑，进后操作系统；双击仪器控制面板图标；右键LC图标，点击打开。 填充瓶 右键泵选择填充瓶，按实际流动项的体积输入确定。

清洗柱塞杆 右键泵的图标选择[控制]，在清洗柱塞杆处选择定期，一般设置为5min，0.2min。 清洗

右键泵的图标选择打开，等待泵开启；再右键泵的图标选择[方法]，设置数量

每一项清洗好后将流量和溶剂配比改为清洗前的设置；顺时针关闭清洗

为5ml/min；A相100%冲洗5min，B相100%冲洗5min，使用哪一项就冲洗哪一项。 结束清洗 阀。

10 清洗色谱柱 如果需要冲洗色谱柱，在仪器状态下先关闭灯，用10%的甲醇冲洗30min，

再用90%的甲醇冲洗30min，最后更改为方法的溶剂配比后关闭所有模板即可。 分析样品 1 2 3 4

选择文件下的[打开][方法]；弹出文件浏览界面，从上部指定路经，下部选择[控制][下载方法]；再选择[控制][仪器状态]，依次右键泵，柱温箱和如果信号窗口不在，可选择[视图][在线信号]，调出窗口，可先点调整，待基线平稳后选择控制，单次运行，在弹出的窗口内输入样品ID，指定

打开方法 下载方法 查看基线 单针进样

双击选择，找到所需方法后双击打开，如果方法打开，窗口最上部显示方法名。 检测器选择[打开]。

再点上或下箭头放大缩小范围，一般设为0-500mAu，看基线是否走平。

一个数据路经，主要输入样口名称，一般可增加个编号+样品名，编号排在前一次做样的后一位；在[样品瓶]后输入进样位置，点击开始。 5

序列进样

点击[文件][新建][序列]；再点击[序列][编辑]在弹出的窗口中一列列选择

并输入位置、方法名称、输入样口名称，编辑好列数后点击[文件]，保存序列，并起个数子序列名；可点击[序列][属性]，指定数据文件存入路经；最后点击[控制][运行序列]。 6

停止分析

如果分析结束后短期等待后再分析，可在仪器状态窗口关闭氘灯，泵控制

查看当前方法是否为需要的方法，如果不是，请打开需要的方法。 选择[打开][数据]，指定到你要打开的数据后双击打开。

里选择待机。 分析样品 1 2 3

打开方法 打开数据 积分

点击[平铺显示]下面的[积分事件]，设置基本积分参数，主要有峰宽，阈值，

最小峰面积，积分关闭，可一边设置一边点击上部分析快捷键，查看效果，使自己需要的峰选择出来并合理积分。 4

报告输出

点击[报告][查看方法报告]，上下查看谱图和结果是否合适，如果合适，

可打印报告，打印时可先从[文件]设置打印机为纸打印或虚拟打印机。 5 6

重新积分

如果报告结果可疑，在信号谱图窗口放大底部重新设置积分参数或直接手

如果谱图上有峰而报告上有紫色显示，无浓度结果，可考虑保留时间

动积分，积好后点击[分析]，后再查看方法报告。 更改保留时间 输出结果。 分析标准样 1 打开方法 2 3

打开数据 积分

查看当前方法是否为需要的方法，如果不是，请打开需要的方法。 选择[打开][数据]，指定到你要打开的数据后双击打开。

是否对应，如果有小的偏差，打开峰组表，直接更改该峰的保留时间，点击分析后重新

点击[平铺显示]下面的[积分事件]，设置基本积分参数，主要有峰宽，阈值，

最小峰面积，积分关闭，可一边设置一边点击上部分析快捷键，查看效果，使自己需要的峰选择出来并合理积分。 4 5

定义峰组

点击[平铺显示]下的[峰组表]，如果有峰全部删除，如果没有，点击下方[定

义峰]，在谱图所需峰的范围的前后各点一下，选择[替换表中现有峰]。

定义峰 在峰组表中按保留时间删除无用的小杂峰，在有用的峰行中依次更改[名称][单

点击[分析][分析/单级校正]，在窗口中选择[校正][想校正的级别]，点开始；如

点击方法下的[检查校正]，可看到以上操作的校正表和其参数，点分别选

位][拟合类型][零点][级别]。 6 校正

果是想清除以前的所有校正，可选择[清除分部校正]。 7 检查校正 8 高级

择不同化合物进行查看，如果有问题，返回以上操作。

高级设置里一般常用为选择[色谱柱/性能]，选择所要的[性能参数]即可。

9 自定义报告 打开自定义报告后右键选择[导入报告]，常用的为外标法报告，点击上放蓝色可打开表头进样更改，双击谱图可更改响应单位，一般为mau；可进行轴设置，注释等操作，在下部表格处可右键加入表格自已想要的输出，如分离度，踏板数等。 10 保存方法 注意事项

1 当排液阀打开，流速设为5mL/min，系统的压力高于5bar时，注意更换泵的过滤白头； 2 每次做完试验后，注意要清洗管路以及色谱柱，防止管路、脱气机及色谱柱的堵塞； 3 每次更换流动相后一定要更改溶剂瓶中流动相的体积；

4 若使用盐时，一定要将盐过滤并且现配现用，不用后将盐立即倒掉，不可将盐放在溶剂

瓶中；

5 切忌用纯的乙腈去冲洗管路；

处理结束后或和处理中间都可以保存方法，点击[文件][方法][保存]，如果

不保存有可能失去前面的设置。