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非典型肺炎病例室检测标本采集技术指南试行

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附件6

非典型肺炎病例实验室检测标本采集技术指南(试

行)

一、病毒分离标本的采集与运送 1、采集

病毒分离成功的关键取决于采集标本的质量,及其保存运输等环节。为提高病毒的分离率,在发病早期,可每天采集1份咽拭子,采集多份痰液。

(1)鼻咽拭子:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签头浸入含4~5 ml样本运输液的螺口试管中,尾部弃去。

(2)痰液:让病人将痰液咳入无菌平皿中,然后用棉签刮取痰液放入含4~5 ml样本运输液的螺口试管中。

(3)嗽口液:用10ml洗液嗽口。

(4)尸检标本:取肺、肝、肾、心、淋巴结、血凝块等组织2厘米×2厘米大小,置于10 螺口试管中。每种组织需要5~10管。

2、标本保存上送

标本采集后应立即冷冻保存,如未能及时接种应置-70℃或以下保存。常用的样品运输液为:pH7.4~7.6的Hank's,Eagle's或水解乳蛋白液。

为防止细菌和真菌生长,在采样液中需加入青、链霉素,终浓度为每毫升 1000单位青霉素和100μg的链霉素,(也可用庆

大霉素,其终浓度为每毫升 1mg,)同时加制霉菌素,终浓度为每毫升4μg。

二、细菌培养标本的采集与运送 1、采集

细菌培养标本最好在抗感染治疗之前采集,可采集咽拭子或痰液。

1) 咽拭子:用无菌湿棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,再将棉签放入无菌试管中。

2) 痰液:让病人直接将痰液咳入无菌平皿中。 2、保存运送

做细菌分离培养的样本密封好常温下2小时内送检。 三、血清标本采集与运送 1、采集

须采集病例的急性期和恢复期血清:

1)尽早采集急性期血样,最迟不晚于发病后7天。恢复期血样则在发病后2~4周采集。

2)无菌采集5ml血液标本,分离血清,冷冻。

3)详细登记有关病例的姓名、性别、年龄等基本信息,发病日期、采样日期等。

2、运送保管

1)血清标本应带冰在24小时内运送至实验室。应分装多管冷冻保存。

2)标本至实验室后,病毒分离标本应尽快进行接种分离,48h内能进行接种的可置于4℃保存,如未能接种应置-70℃或以下保存。

3)血清标本可在4℃存放一周,长期保存置-20℃或以下。

四、实验室安全指南

样本检验采取就地检验的原则,当地医院能开展的项目在当地检测,同时将血清样本和咽拭子等相关样本送当地疾控中心检验。

病原分离检测必须在II级生物安全实验室内,严格按照无菌操作和生物安全防护原则进行。

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