微生物的培养与应用
一、单选题
1．下列关于生物工程的叙述中，不正确的是（ ）
A．动物细胞培养可用于检测污水中致癌和致畸物质的毒性 B．标记基因可用于检测运载体是否被导入受体细胞 C．DNA探针可用于检测苯丙酮尿症和21三体综合症
D．选择培养基可用于筛选单克隆杂交瘤细胞、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌 【答案】C 【解析】
2．关于菌种保藏叙述不正确的是
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法 B. 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法
C. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长 D. 对于需要长期保存的菌种,可以采用4 ℃冰箱中保藏的方法 【答案】D
【解析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A错误；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法，采用-20 ℃冰箱中保藏，B正确， D错误；临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，C正确。
3．总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是
A. 总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外 B. 总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关
C. 相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多 D. 接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好 【答案】C
【解析】状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。
4．下列关于纤维素酶的说法，错误的是( ) A．纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分 B．葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 C．纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁
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D．纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 【答案】B
【解析】纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，A正确；葡萄糖苷酶可把纤维二糖分解成葡萄糖，B错误；植物体细胞的细胞壁主要由纤维素和果胶组成，所以纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁，C正确；纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖，D正确．
【考点定位】 果胶酶的活性测定
【名师点睛】纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．但刚果红可以与纤维素形成红色复合物，并不和水解后的产物发生这种反应． 5．下列关于微生物营养的说法正确的是 A. 同一种物质不可能既做碳源又做氮源 B. 除水以外的无机物仅提供无机盐 C. 凡是碳源都能提供能量 D. 无机氮源也可以提供能量 【答案】D
【解析】对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A错误；CO2和N2是无机物，也是某些微生物的碳源和氮源，B错误；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量，C错误自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量，叫做化能合成作用，D正确。
6．下列有关平板划线操作的叙述，错误的是 ( )
A．在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 【答案】D 【解析】
试题分析：每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧，故A正确；灼烧后的接种环需冷却后再蘸取菌液，故B正确；蘸取菌液和划线都要在酒精灯的火焰旁进行，故C正确；划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连，故D错误。
考点：本题考查平板划线法的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
7．关于灭菌和消毒的理解不正确的是（ ）
A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质上是相同的 C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等 【答案】B 【解析】
试题分析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子，A项正确；常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等，其中接种环用灼烧法灭菌，C、D项正确；消毒是指用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部部分微生物，综上所述，B项错误。
考点：本题考查灭菌和消毒的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
8．下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是 A．此培养基可用来培养自养型微生物
2
B．若除去①，此培养基可用于培养圆褐固氮菌
C．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
D．培养基中若需加入氨基酸，它可充当碳源、氮源、生长因子和能源 【答案】B
【解析】本题考查微生物的培养相关知识。
由题知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，选项A、C、D均对；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培养基中必须含含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，B错。
9．下列有关MS培养基与微生物培养基的说法错误的是 （ ） A．MS培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要 B．MS培养基中的碳源和能源是蔗糖
C．MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素
D．MS培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素等微生物必需的营养物质
【答案】D 【解析】
10．不同培养基的具体配方不同，但一般都含 A. 碳源、磷酸盐和维生素 B. 氮源和维生素 C. 水、碳源、氮源和无机盐 D. 稀有元素 【答案】C
【解析】不同的培养基都需要含有最基础的成分，即水、无机盐、碳源和氮源，C正确。磷酸盐和维生素不是所有培养基都要含有的，A、B错误。稀有元素也是在某些特殊培养基中才有的，D错误。
11．下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是
A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其你拟核实一个环状DNA分子 B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源 C．用大肠杆菌工程菌生产干扰素时，应及时添加核算等生土长基因子 D．处于对数期的大肠杆菌，常作为生产作用的菌种和科研的材料 【答案】Ｄ
【解析】大肠杆菌以二分裂方式进行繁殖；在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌存在分解葡萄糖的组成酶和分解乳糖的诱导酶，分解葡萄糖的组成酶一直存在，只有葡萄糖分解完后，乳糖才能诱导产生分解乳糖的诱导酶，所以大肠杆菌首先利用葡萄糖作碳源；大肠杆菌的生长不须要生长因子；处于队数期的大肠杆菌生长繁殖活跃，代谢稳定，常作为生产作用的菌种和科研的材料。 12．下列相关实验组合不正确的是
A. 显微镜直接计数----统计微生物数量
B. 预实验----摸索“探究木瓜蛋白酶最适pH”的实验条件 C. 对比实验----探究酵母菌的呼吸方式
D. 标志重捕法----调查植株上蚜虫的种群密度 【答案】D
【解析】试题分析：蚜虫的活动能力弱、活动范围小，因此调查蚜虫的种群密度的方法是样方法，故D错误。
考点：本题主要考查教材中的实验，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。
13．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离
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成分 甲培养基 乙培养基 KH2PO4 0.02% 0.02% MgSO4·7H2O 0.02% 0.02% NaCl 0.02% 0.02% CaSO4·2H2O 0.01% 0.01% CaCO3 0.5% 0.5% 葡萄糖 纯淀粉 0.5% — 2% —
A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌 B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌 C．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌
D．甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌 【答案】B
【解析】固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的固氮菌，故选B。 【考点定位】微生物的分离和培养
【名师点睛】葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；不含有机碳源的培养基，适用于自养微生物的生长。
14．将大肠杆菌从菌种试管接种到另一支试管的操作，下列说法有误的一项是 A．整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行
B．接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种 C．菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次 D．带菌的接种环应在培养基面上轻轻划线 【答案】B 【解析】
试题分析：将大肠杆菌从菌种试管接种到另一支试管的操作时，需避免杂菌污染，所以整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近无菌区进行，A正确；接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后需先冷却，然后伸入菌种试管挑取少许菌种，B错误；菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次，C正确；带菌的接种环应在培养基面上轻轻划线，D正确。
考点：微生物的接种与培养
15．下列有关生物技术的叙述正确的是
A．对胡萝卜素的提取过程中,浓缩是在过滤之后
B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长 C．固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比酵母细胞快
D．实验室进行微生物筛选时，要为所有微生物提供适宜的生长条件 【答案】B
【解析】制作腐乳时，盐可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长。
16．豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是 A. 该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量
B. 大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味 C. 若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌 D. 煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质
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