夜香树提取物对小鼠白血病L1210细胞生长的抑制作用

夜香树提取物对小鼠白血病L1210细胞生长

的抑制作用

罗发军 钟振国 赵华平 赵世元

【摘要】 目的探讨夜香树不同提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制作用及机制。方式采纳四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法、平板集落法和Hoechst33258荧光染色法观看夜香树提取物对L1210细胞的生长抑制和凋亡的阻碍。结果夜香树提取物中正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞有浓度依托性的细胞毒性作用，在终浓度为 μg·ml-1范围，其正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞的抑制率大于90%，IC50均小于10 μg·ml-1，夜香树正丁醇和多糖提取物能抑制L1210细胞集落形成，并可诱导L1210细胞发生凋亡。结论夜香树提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制可能通过诱导L1210细胞发生凋亡而发挥作用。

【关键词】 夜香树提取物； 小鼠白血病细胞； 细胞增殖； 集落形成

Abstract：ObjectiveTo evaluate the inhibitory effect of different extracts from Cestrum nocturnum Linn..(CN) on mouse leukcmic L1210 cells and explore its mechanism. MethodsThe MTT assay, colony forming experiment and Hoechst 33258 fluorescence

measurement were used to analyze the effect of extracts from CN on leukcmic L1210 cells. ResultsThe n-bulty alcohol part and polysaccharide part extracted from CN had dose-dependent effects of the concentration was μg·ml-1, the inhibitory rate of cells growth was above 90% and the IC50 was below 10 μg· inhibitory rate of cells had remarkable dose-dependence. They both could inhibit colony information and induce apoptosis of L1210 cells. ConclusionThe inhibitory effect of extracts from leukemic L1210 cells prolifertion may be related with apoptosis.

Key words：Extracts from Cestrum nocturnum Linn.； Leukemic； Proliferation； Colony forming

夜香树，又名夜来香，茄科属植物Cestrum nocturnum Linn.，文献报导夜香树提取物有抗实验心率失常局部麻醉和中枢抑制作用［1，2］。课题组将夜香树（以下简称CN）叶及嫩枝用乙醇进行渗漉提取后，浸膏以系统溶剂分离进行部位分离，取得CN提取物，体外培育小鼠白血病L1210细胞，观看不同浓度的CN提取物对其抑制作用，初步探讨其抑制作用的机制。现报导如下。

1 材料和方式

药物 CN叶及嫩枝采自广西境内，经本院药用植物教研室刘寿养教授鉴定为茄科属植物夜香树Cestrum nocturnum Linn.。

受试药物的提取及配制CN叶及嫩枝经日晒干燥后，采纳渗漉法得乙醇浸膏，浸膏用硅胶拌匀后，依次用石油醚，醋酸乙酯，水饱和正丁醇，然后用95%乙醇和50%乙醇等回流提取，回收溶剂，得CN石油醚部位、 CN醋酸乙酯部位、CN正丁醇部位、CN多糖部位。CN正丁醇部位和CN多糖部位别离用生理盐水注射液配制成5 mg·ml-1，G6漏斗滤过除菌，4℃冰箱内保留备用。

细胞培育 L1210细胞系小鼠淋巴细胞白血病细胞，购自上海细胞生物研究所细胞库。将L1210细胞接种于DAB/2小鼠腹腔内，传代保种。临历时处死小鼠抽取腹水，离心搜集细胞，经洗涤后用含10%胎牛血清的RPMI 1640培育液进行培育，在含5%CO2的37℃温箱中培育，每3 d传代1次。

MTT比色法［3］检测CN提取物对小鼠白血病L1210细胞增殖的阻碍取对数生长期的L1210细胞用含10% FBS的RPMI 1640培育液配成1×104·ml-1，接种在96孔培育板中，每孔200 μl，每组设4个平行孔。置37℃，10%CO2培育箱中培育24 h后, 离心弃上清，实验组别离加入最终浓度为，，，， μg·ml-1的CN提取物的培育液，正丁醇部位和多糖部位的对照组那么加入等体积溶剂的培育液，而石