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罗氏realtime PCR操作指南(Roche LightCycler480)

来源:用户分享 时间:2025/7/9 20:39:33 本文由loading 分享 下载这篇文档手机版
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LightCycler? 480 系统快速操作指南

一.配制好反应体系,封好膜。接通LC480与电脑电源,电脑帐号operator,密码LC480,点击LC480软件二.开始实验:点击击窗口右下角的开始实验。 三.编辑子集:点击的孔,最后点击

subset editor,点击左下角的

,按ctrl键的同时鼠标选择本次实验

,登录帐号user,密码Master1。

,在列表中选择对应的程序,如H1N1或HBV,点

,输入实验文件名点击窗口右下角的

,点击软件界面右下角的

应用。注意,一次实验可以同时运行相同扩增参数的多个实验(如

H1N1、HIV与HCV),那么可以分别设置多个子集

设置样品:先在subset中选择本次实验的子集,点击左上角的

,样品输入样

品名,再选择标准品类型和浓度或者阳性对照/阴性对照

四.数据分析: 实验运行完成后进入

,选择Abs Quant/Fit Ppoint,在窗

口中的Subset(第二行)中选择本次实验的子集,点击软件界面中上方的

,在Noise Band中调节noise

band高度,使之处于对数增长期并高于所有噪音信号,如右图。 再点击进入

,点击软件界面中间偏右的

自动设置阈值或手工调节阈值(鼠标左键按住拖动或在输入阈值大小),再点击软件界面左下角的,软件左下方出现每个样品的Ct值或浓度值等以及平均值标准误等信息,该部分可以鼠标拖动滑块或鼠标拖曳、

鼠标点击软件右上角的为本次分析命名,如输入H1N1或其它名称 五.报告输出打印:点击软件右侧的

保存当前实验的分析结果,再点击软件左侧的

点击软件中部左侧的detailed 选择需要输出的分析结果,如 H1N1, 分析中建议选择results或standard curve,点击软件界面左下方的

,生成PDF报告,如装了打印机,直接

,或者点击

,选择pdf文件

点击软件中间上方的

保存位置后点击save保存

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