专题31 克隆技术
挖命题 【考情探究】
考点 内容 要求 5年考情 考题示例 一、植物的克隆 植物的克隆 b 2017浙江11月选考,32(二),7分 素养要素 难度 科学思维 难 ★★★★☆ 科学探究 预测热度 二、动物的克隆 动物的克隆 a 2014浙江理综,3,6分 科学思维 中 ★★★★☆ 分析解读 本专题包括动、植物克隆的相关知识,为选考加试部分考查内容。预计今后考查形式仍以非选择题为主,重点考查植物克隆的方法和应用。复习时注意比较动、植物克隆的基本原理和方法,理解单克隆抗体的制备原理和方法。
【真题典例】
破考点 考点一 植物的克隆 【考点集训】
考向 植物的克隆
【加试题】[2017浙江台州选考质检,32(二),8分]某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题:
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(1)对于已获得的Bar基因可以用 技术进行扩增。图中的a过程通常使用相同的 酶和DNA连接酶,使目的基因与载体连接形成重组DNA分子。
(2)在b过程中,获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶外,还需要用到的试剂是 。
(3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ ,进而生长发育成植株。下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征的是 。 A.薄壁细胞 B.细胞质丰富 C.液泡小
D.细胞核小
(4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否培育成功,比较简便的检测方法是 。
答案 (1)PCR 限制性核酸内切 (2)(较高浓度的)甘露醇 (3)愈伤组织 D (4)用一定浓度的除草剂喷洒,观察转基因大豆的生长情况
考点二 动物的克隆 【考点集训】
【加试题】[2019届浙江绍兴9月联考,32(二),7分]回答与动物克隆有关的问题: (1)广义的动物组织培养包括 和器官培养,器官培养是指 、器官的一部分或整个器官在体外和人工控制的条件下得以保存、生长。
(2)细胞融合是细胞工程的主要技术手段之一,其中电融合技术的原理是在低压交流电场中 ;而细胞杂交是 的细胞间的融合。
(3)单克隆抗体的制备中,往往在经过免疫的动物的 (器官)中获得能产生抗体的效应B细胞,经融合和筛选再培养,筛选的目标
是 。
(4)若想通过基因工程制备大量的单一抗体,下列方法可行的是 ( ) A.将抗体基因直接导入小鼠骨髓瘤细胞
B.将含有抗体基因的重组DNA分子导入小鼠骨髓瘤细胞 C.将含有抗体基因的重组DNA分子导入人的浆细胞 D.将含有调控抗体产生基因的重组DNA分子导入人的浆细胞 答案 (1)细胞培养、组织培养 器官的原基 (2)击穿质膜脂双层,导致细胞质融通 不同基因型 (3)脾脏 既能产生特异抗体又能无限增殖的细胞 (4)B
炼技法
方法 单克隆抗体的制备
【方法集训】
【加试题】(2017浙江台州2月模拟,32)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。
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(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂—— 介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的 培养,获得纯系细胞,同时还要进行 检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。 (2)获得杂交瘤细胞后,在体外培养时需要特别加入的天然成分是 。 (3)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是 。 A.用固体培养基培养 B.用滋养层细胞支持生长 C.能进行传代培养
D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物
(4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导入受体细胞,该技术的核心步骤是 ,噬菌体是这些关键基因的 。
答案 (1)灭活的(仙台)病毒 克隆 抗体 (2)动物血清 (3)C (4)形成重组DNA分子 载体
过专题 【五年高考】
A组 自主命题·浙江卷题组
考点一 植物的克隆
1.【加试题】[2017浙江11月选考,32(二),7分]回答与植物克隆和动物克隆有关的问题: (1)利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径:一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的 途径,二是由愈伤组织细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外也可不通过愈伤组织阶段而直接采用带腋芽的茎段培养成丛状苗,再诱导生根获得再生植株,其原因是腋芽中存在 。 (2)利用植物克隆培育新品种,一方面可利用带有目的基因的 侵染植株,或将目的基因
通过 的方法导入植物细胞、组织或器官获得转基因植株。另一方面利用异源植株的 进行融合产生杂种植株,或利用异源植物在试管内进行 ,对其产生的胚进行培养产生杂种植株。
(3)下列属于植物克隆和动物克隆共有的培养方法是 (A.悬浮培养、器官培养 B.贴壁培养、传代培养 C.器官培养、愈伤组织培养 D.原生质体培养、传代培养)。 答案 (1)器官发生 分生组织 (2)农杆菌 显微注射 原生质体 受精 (3)A
2.【加试题】[2016浙江10月选考,32(二),7分]某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答:
(1)原生质体的分离:在无菌条件下,取烟草无菌苗的叶片,放入含有0.5 mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的 。
混合液处理,经过离心纯化后获得原生质体。
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(2)原生质体的培养:将原生质体进行培养,重新长出细胞壁,形成胚性细胞。此时,应该 培养基中甘露醇的浓度,以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,然后经两条途径形成再生植株。途径一:细胞团经球形胚、
和胚状体,最后发育成植株。途径二:细胞团增殖为愈伤组织,然后在发芽培养基上诱导出芽,再经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是 ,胚性细胞的主要特点是: 。(A.液泡小、细胞核小 B.液泡大、细胞核大 C.液泡大、细胞核小 D.液泡小、细胞核大)
(3)为了对烟草的某些性状进行改良,分离得到两种烟草的原生质体后,通过 方法将它们的遗传物质组合在一起,经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA,采用 扩增相关基因,来鉴定遗传物质是否成功重组。 答案 (1)果胶酶和纤维素酶 (2)降低 心形胚 细胞分裂素 D (3)原生质体融合 PCR
3.(2015浙江自选,18,10分)下面是关于植物克隆和生态工程的问题。请回答:
(1)为培育能高效吸收和富集重金属镉的转基因植物,将野外采得的某植物幼叶消毒后,用酶混合液处理,获得了原生质体。酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇,其作用是① 。
(2)将目的基因导入原生质体,经培养形成愈伤组织,再通过② 得到分散的胚性细胞,发育成③ ,生长发育后获得转基因植株。
(3)愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力,下列原因错误的是④ 。 ．．A.愈伤组织发生遗传变异 B.愈伤组织不能分散成单细胞 C.愈伤组织中激素平衡发生改变 D.愈伤组织对外源激素敏感性发生改变
(4)某农业生态工程基地按照生态和⑤ 规律,对种植业和养殖业进行了优化设计。通过套种、间种和⑥ 等技术的应用,使种植的农作物为该生态系统组成成分中的⑦ 提供更多的食物。在农业生产中尽量不施用农药,其目的是⑧ 。 A.减少水土流失 B.减少土壤肥力 C.减少环境污染 D.减少生物多样性 答案 (1)①维持渗透压 (2)②液体悬浮培养 ③胚状体 (3)④B
(4)⑤经济 ⑥轮种 ⑦消费者 ⑧C 考点二 动物的克隆
1.(2014浙江理综,3,6分)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( ) A.连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 B.某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞 C.由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D.未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状
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