DNA复制、转录、翻译以及PCR技术比较DNA复制(细胞内复制) DNA复制是指DNA双链在细胞分裂 以前进行的复制过程,复制的结果是 一条双链变成两条一样的双链(如果 复制过程正常的话),每条双链都与 原来的双链一样 细胞核、线粒体、叶绿体 4种游离脱氧核苷酸 DNA分子中的两条链
解旋酶、DNA聚合酶等(DNA连接酶) K|S|5U(转录
DNA分子首先解开双链以DNA的一条链 为模板按照碱基互补配对原则合成RNA 的过程
细胞核、线粒体、叶绿体
K|S|5U翻译以mRNA为模板,以tRNA为运载工具.合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质
的过程 K|S|5U整理: 李秀志编号:
PCR技术(体外DNA复制技术)PCR技术是一项在生物体外复制特定
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DNA片段的核酸合成技术。 概念 场所 原料 模板酶能量
过程细胞质(核糖体)
K|S|5U体外4种游离脱氧核苷酸目的基因(或目的基因的两条链)K|S|5U4种游离核糖核苷酸
K|S|5U20种游离氨基酸 K|S|5UDNA中的一条链 K|S|5UmRNA
K|S|5U解旋酶、RNA聚合酶等 ATP 1、解旋:
在解旋酶作用下,利用ATP释 放的能量解开双螺旋; 2、\以解开的一条
DNA链为模板,按碱基互补配对原则, 游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对, 3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成
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RNA(mRNA,tRNA,rRNA)不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等ATPmRNA从核孔进入细胞质,与核糖体结合,从起始密码子(AUG)开始翻译。
tRNA一端携带氨基酸进入核糖体.另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对,两氨基酸间形成肽键。核糖体继续耐热DNA聚合酶(Taq酶)不需要ATP,能量来自外界加热
1、\变性:
即加热至高温使得目的基因的双链打开(解旋,但不需要解旋酶); 2、\退火(复性):
降温使得解开的两条链分别与引物结合; 3、\延伸:
在Taq酶的作用下,按碱基互补配对原则,脱氧核苷ATP 1、解旋:
在解旋酶作用下,利用ATP释 放的能量解开双螺旋; 2、\在DNA聚合
酶的作用下,按照碱基互补配对原则, 把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上, 并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连 接;
3、\沿着模板链不断延伸,最终形成
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两个一模一样的DNA分子。沿mRNA移动,每次移动一个密码子,酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复至终止密码结束,肽链形成上述三步,就能获得大量的目的基因。
扩增后,模板链与新合成的子链形成具
有双螺旋结构的目的基因一条mRNA可与多个核糖体结合翻译成多条相同的多肽链
1、\半保留复制; 2、\快速大量复制模板 去向
特点复制后,模板链与新形成的子链形成双 螺旋结构
1、边解旋边复制;
2、\半保留复制转录后,模板链与非模板链重新形成双 螺旋结构
边解旋边转录分解成核糖核苷酸产物形成两个完整的DNA分子三种单链RNA蛋白质(多肽链)短时间内形成大量的目的基因
二、在基因过程的各种检测和鉴定: 1、标记基因:
为了检测目的基因(目的基因表达载体)是否导入受体细胞; 2、\用DNA分子杂交法:
检测目的基因是否插到染色体DNA上(工具: 基因探针)
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3、\用DNA分子杂交法:
检测目的基因是否转录出mRNA(工具: 基因探针);
4、\用抗原—抗体杂交法: 检测mRNA是否翻译出蛋白质; 5、\鉴定: 个体水平鉴定: 比如抗虫实验。
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