常用的转基因种子检测方法

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常用的转基因种子检测方法

作者：娄艳春

来源：《中国科技博览》2013年第23期

[摘 要]本文主要介绍了几种常用转基因种子的检测方法，主要包括定性PCR检测方法、实时荧光定量PCR检测方法、特异蛋白检测法和生物表现型检测法，并简要介绍了这些方法的应用和优缺点，可供转基因种子检测研究参考。 [关键词]墓因；品种；种子；特异性；检测；蛋白质

中图分类号：S329 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）23-0080-01

随着全球和我国植物转基因品种的推广应用，转基因种子的应用越来越广泛。作为高科技产品，价格自然比较高，经营利润也水涨船高。个别种子经销商为追求高利润以假充真，以次充好，严重损害农民的利益，给农民和消费者带来无法估量的损失。因此，为维护市场环境，保护消费者利益，选择合适的检测方法对植物转基因品种进行真实性和纯度鉴定是十分必要的。目前，我国能开展检测的转基因产品主要有大豆、玉米、油菜、水稻、棉花等作物及其制品。本文将较全面地概述常用转基因种子的检测方法，并分析其各自的特点。 1 定性PCR检测技术

以PCR技术为基础的转基因种子定性检测，根据其特异性的不同至少可以分为4类：筛查法、基因特异性方法、构建特异性方法和转化事件特异性方法。 1.1 筛查法

对转基因种子中的通用元件进行检测，包括启动子、终止子和报告基因NPT-II等。最常见的是对CaMV35S启动子或NOS终止子的检测。仅仅鉴定筛选基因，已经不能满足转基因产品检测的要求。这是因为35S启动子存在于天然花椰菜花叶病毒，NOS终止子存在于植物病毒Ti质粒中，抗生素类的报告基因自然界中也普遍存在，因而仅是检测筛选基因，极易出现假阳性结果，同时也达不到鉴定转基因植物的目的。 1.2 基因特异性方法

是指插人DNA序列或特定因子（在整合位置的DNA序列）对目的基因进行检测。检测时，能获取的目的基因的数量要比启动子和终止子多很多。因此，以目的基因为特征序列的基因特异法更具有特异性。 1.3 构建特异性方法