人教版高中生物选修三
专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序
1．基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是( )
A．目的基因、限制酶、载体、受体细胞 B．工具酶、目的基因、载体、受体细胞 C．模板DNA、mRNA、质粒、受体细胞
D．重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶
[解析]基因工程的基本工具是限制酶、DNA连接酶和载体，前两者统称为工具酶；在实际操作中，载体上插入目的基因形成重组载体，然后导入受体细胞。
[答案]B
2．在已知某目的基因的一段核苷酸序列的情况下，要在短时间内大量获取该目的基因，最简便的方法是( )
A．化学合成法 C．cDNA文库法
B．基因组文库法 D．利用PCR技术扩增
[解析]利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物，进而在一定条件下利用DNA双链复制的原理，将目的基因的核苷酸序列不断地加以复制。通过这
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一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。
[答案]D
3．将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是( )
A．显微注射技术 农杆菌转化法 B．基因枪法 花粉管通道法 C．农杆菌转化法 显微注射技术 D．基因枪法 显微注射技术
[解析]玉米是单子叶植物，对单子叶植物来说，常用的方法是基因枪法；对于动物细胞来说，常用的方法是显微注射技术。
[答案]D
4．检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的常用方法是( )
A．DNA分子杂交技术
B．荧光分子标记技术
C．放射性同位素标记技术 D．显微注射技术
[解析]检测目的基因常采用DNA分子杂交技术，即在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等进行标记，以此作为探针，并使探针与基因组DNA杂交，若显示出杂交带，则表明目的基因已插入染色体DNA中。
[答案]A
5．下图为基因表达载体的模式图，有关说法错误的是( )
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A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶 B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别
C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位
D．抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
[解析]构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；不同基因表达载体上的酶切位点和标记基因都有可能不同，B错误；启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，C正确；抗生素抗性基因的作用就是作为标记基因，用于检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。
[答案]B
6．(2016·海南卷)基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题： (1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即________和从________中分离。
(2)利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________
_______________________________________________________
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_____________________________________________________。 (3)在基因表达载体中，启动子是________聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是________。
(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有________和________颗粒。
[解析]本题主要考查目的基因的获取方法、基因表达载体的构建方法、目的基因导入植物细胞的方法。
(1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，既可在核苷酸序列已知的情况下人工合成，也可用限制酶对生物材料的DNA切割，再选取。
(2)cDNA文库是由mRNA反转录获得的，其中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。
(3)在基因表达载体中，启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是大肠杆菌。
(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒。
[答案](1)人工合成 生物材料
(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因
(3)RNA 大肠杆菌(或细菌)
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