生物化学答案

3、什么是离心技术？离心技术的原理是什么？

4、盐析法沉淀蛋白质时，往往需要将PH调到蛋白质等电点附近，为什么？

解释盐析法沉淀蛋白质的基本原理？ 答：蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。而当蛋白质在等电点处时，蛋白质不带电，溶解度小，当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。 5、电泳现象的产生与蛋白质的分子结构有何关系？

6、电泳是分离生物大分子的主要方法之一。请简述其原理。

7、测定酶活力时应遵循哪些基本原则？为什么?

四、问答题

1、试分别阐述分配层析和吸附层析法分离鉴定氨基酸的原理和操作步骤。

2、聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么特点？试述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的基本原理和主要操作步骤。

3、以DNA分离纯化为例，阐述生物大分子分离纯化的基本原则原理和注意事项。

4、什么叫酶的活力和比活力？测定酶活力时应注意什么?为什么测定酶活力时以测定初速

度为宜，并且底物浓度远远大于酶浓度？

5、在PH6.5的谷氨酸和丙酮酸混合液中，加入适量的新鲜猪肝匀浆后于37度水浴中保温30分钟，煮沸后蛋白质沉淀，将上清液点在层析滤纸上，用酚水饱和液进行层析，层析结束后茚三酮显色出两条带，这两条带各是什么物质，说明原因。

6、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的相对分子量，其原理是什么？相对分子质量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与其相对分子量之间有什么关系？

7、试比较核酸测定序列、和蛋白质测序方法策略上的异同。

8、什么是Western印记？它与 Southern印记有什么不同？

9、在产品中提取一种蛋白质，它有强的酶的活性，请问用下列那种方法好。为什么？（1）先盐析，在用SDS-PAGE法提纯。（2）先盐析，在用凝胶过滤法提纯。