高二生物学案 “讲给别人听是最好的学习方式！” 学案编号1 选修3 专题1基因工程1.1《DNA重组技术的基本工具》
编写人：高二生物组
在自然条件下，噬菌体侵染大肠杆菌时能将其DNA注入大肠杆菌；土壤农杆菌侵染植物时，能将其质粒带入到宿主细胞。20世纪50年代，有科学家将一种噬菌体分别于两种细菌共同培养,多次实验结果表明噬菌体只在一种细菌中成活。经过研究，终于发现细菌中存在两种酶，一种是限制性内切酶，可切割降解外源DNA；另一种是修饰酶，能修饰DNA中的核苷酸，使得DNA不被限制性内切酶降解。……由于基因工程的诞生，实现了在微生物、动物、植物之间的基因交流，人类以前不能实现的种种奇思妙想将变为现实。
一．问题
1．限制酶主要是从何种生物中分离纯化得到的？
2．限制酶能识别DNA的特定序列并在特定的部位进行切割，这体现了酶具有什么特点？ 3．不同限制酶切割形成的黏性末端能发生粘合吗？借助于什么来完成粘合？ 4．DNA连接酶与DNA聚合酶有何异同？
5．生物体内细胞进行DNA复制过程中用到DNA连接酶吗？
6．利用基因工程技术能否对生物的性状进行定向改造吗？这种技术应用了哪种可遗传变异原理？
7．为什么基因工程载体要具有随染色体DNA进行同步复制的能力？ 8．基因工程诞生的理论基础是什么？
二、练习
1．下列粘性末端能用DNA连接酶将它们连接起来的是（ ）
A．①② B．②③ C．②④ 2．下列不属于质粒被选为载体的理由是 ．
D．③④
A．能复制 B．它是环状DNA C．具有标记基因 D．具有限制酶切点 3．限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是：（ ）
A．G与A之间的键 B．G与C之间的键 C．A与T之间的键 D．磷酸与脱氧核糖之间的键 4．科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
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高二生物学案 “讲给别人听是最好的学习方式！”
A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B．有利于鉴定目的基因否导入受体细胞 C．增加质粒分子的相对分子质量 D．便于与外源基因连接 5．下列关于限制酶的说法不正确的是
A．限制酶主要从原核生物细胞中分离纯化 B．不同的限制酶一般识别不同的核苷酸序列 C．限制酶的作用只是用来提取目的基因
D．限制酶能识别特定的核苷酸序列体现了酶的专一性 6．下列不可作为基因工程中的标记基因的是（ ）
A．抗性基因 B．发光基因 C．贮藏蛋白的基因 D．产物具有颜色反应的基因 7．下面图中a、b、c、d代表的结构正确的是（ ）
A．a—质粒RNA B．b—限制性外切酶 C．c—RNA聚合酶 D．d—外源基因
8．下图表示某限制酶切割某DNA的过程，据图判断该限制酶能识别的核苷酸序列及切点是（ ）
A、CTTAAG，切点在C和T之间 B、CTTAAG，切点在G和A之间 C、GAATTC，切点在G和A之间 D、CTTAAC，切点在C和T之间 9．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是
A．限制酶和DNA连接酶 B．DNA聚合酶和限制酶
C．DNA连接酶和解旋酶 D．DNA聚合酶和RNA聚合酶 10．右图为双链DNA结构，下列叙述不正确的是
A．连接a处的酶为DNA连接酶 B．切断b处的酶为解旋酶
C．切断a处的酶为限制性核酸内切酶 D．切断b处的酶为限制性核酸内切酶 11．下列关于限制酶的说法正确的是( )
A． B．一种限制酶只能识别一
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C．不同的限制酶切割DNA D． 12．质粒之所以能做基因工程载体，是由于它( )
A．B． C．是RNAD． 13. ( )
①限制酶 ②连接酶 ③解旋酶 A．①② B．③④ C．①④ D．
学案编号2 选修3 专题1基因工程1.2《基因工程的基本操作程序》
编写人：高二生物组
一．问题
1、目的基因获取的方法有哪些？ 2、如何从基因文库中获取目的基因？ 3、PCR技术扩增目的基因需要哪些条件？
4、结合DNA分子结构的知识，分析PCR技术中DNA解链温度（90℃～95℃）高低取决于什么？ 5、基因表达载体中启动子的作用是什么？ 6、重组质粒与质粒的主要区别是什么？ 7、基因表达载体的组成有哪些？
8、可以将目的基因导入动物的体细胞来获得转基因动物吗？ 9、原核细胞作为受体细胞的优点有哪些？
10、怎样检测目的基因是否插入转基因生物的染色体上？ 11、导入受体细胞中的目的基因是否一定能够成功表达？ 12、如何使目的基因表达的产物与天然产品相同？
13、通过基因工程培育的抗虫棉在生产实践中有哪些优点？如何确定其抗性的程度呢？ 14、在基因工程的操作步骤中，哪一步是其核心？未发生碱基互补配对的步骤是哪一步？ 二、练习
1、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是 A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 2、哪项不是基因表达载体的组成部分 A．启动子 B．终止密码 C．标记基因 D．目的基因 3、采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是
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高二生物学案 “讲给别人听是最好的学习方式！” ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 A．①② B．②③ C．③④ D．①④
4、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 ①检测受体细胞是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录信使RNA ④检测目的基因是否翻译蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 5．下列属于获取目的基因的方法的是
①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ 6．不属于目的基因与运载体结合过程的是
A．用一定的限制酶切割质粒，露出黏性末端 C．将切下的目的基因插入到质粒的切口处 B．用同种限制酶切割目的基因，露出黏性末端 D．将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增 7．分辨基因工程是否成功是通过
A．提取目的基因 B．基因表达载体的构建 C目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定 8．下列不属于获取目的基因的方法的是
A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．利用DNA聚合酶复制目的基因 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因 9．下列获取目的基因的方法中需要模板链的是
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③ 10．在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中，下列哪组是所需要的
①同一种限制酶切割两者； ②不需同一种限制酶切割两者； ③加入适量的DNA连接酶；④不需加DNA连接酶 A．①③ B．①④ C．②④ D．②③ 11．下列说法中正确的是
A．基因表达载体的构建方法是一致的 B．标记基因也叫做抗生素基因
C．显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法 D．大肠杆菌是常用的微生物受体
12．下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法
A．基因枪法 B．显微注射法 C．农杆菌转化法 D．花粉管通道法
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