1:实验组:③293、④skov3、⑤ecv、⑥ht-29 2:对照组:①未转染sk-n-sh 3:实验组:②转染后sk-n-sh 三、检测nep高表达对aβ促神经细胞凋亡的保护作用 (一)、材料 四甲基偶唑氮盐(mtt),大连takara公司产品;elisa试剂盒购自promega公司; β-淀粉样肽(aβ25-35): sigma公司产品。用前处理:向aβ25-35中加入943ul灭菌的生理盐水,配成1mm的浓度,37℃孵育7天,使其老化变为聚集状态的 aβ25-35。4?c贮存备用,
用时稀释。工作浓度为20um,作用时间为48h。 (二)、方法
1. mtt法检测细胞活力 将细胞分为4组:①正常sk-n-sh细胞组,②ppdgf-nep+aβ组、③ppdgf-egfp+aβ组、④aβ组。将sk-n-sh细胞按5×103/孔接种于96孔板,培养至50%~60%丰度,分别将重组质粒ppdgf-nep和ppdgf-egfp转染至②、③细胞组,之后加入aβ25~35(20μmol/l)孵育,48h后每孔加入10μl mtt溶液(5mg/ml),采用bio-rad酶标仪测570nm波长吸收值。每组实
验设6个复孔,重复3次。
图4 mtt检测细胞预期存活率 1、sk-n-sh细胞组 2、ppdgf-nep+aβ组 3、ppdgf-egfp+aβ组 4、aβ组 2. elisa 按照elisa试剂盒说明书操作,先做标准曲线。再进行细胞分组:①正常sk-n-sh细篇
四:皮内注射用卡介苗说明书 皮内注射用卡介苗说明书 产品名称 皮内注射用卡介苗 英文名称 bcg vaccine for intradermal injection 用途分类 抗结核及麻风类/结核病 主要成份
系卡介菌种经培养 收集菌膜 混悬于灭菌保护液内 经冻干而制成 用 途
预防结核病 接种对象为出生3个月以内的婴儿或用旧结核菌素试验阴性的儿童 用法用量 1 接种对象为出生3个月以内的婴儿或用5iu稀释旧结核菌素或5iu ppd(结核菌素蛋
白衍化物)试验阴性(结素或ppd试验后48~72小时局部硬结在5mm以下者)的儿童 2 菌苗稀释 用灭菌的1ml注射器将随制品附发的稀释液定量加入冻干皮内注射用卡介苗安瓶中 放置约1分钟 摇动安瓶使之溶化后 用注射器来回抽动数次 使充分混匀 每支安
瓶自稀释时起 必须在半小时内用完 以防污染 3 接种方法 先用75℅酒精消毒上臂外侧三角肌中部略下处皮肤 然后用灭菌的1ml蓝心
注射器(25~26号针头)吸取摇匀的菌苗 皮内注射0.1ml 产品说明 【药理作用】 1 结核菌是细胞内寄生菌 因此人体抗结核的特异性免疫主要是细胞免疫 接种卡介苗是用无毒卡介菌(结核菌)人工接种进行初次感染 经过巨噬细胞的加工处理 将其抗原信息传递给免疫活性细胞 使t细胞分化增殖 形成致敏淋巴细胞 当机体再遇到结核菌感染时 巨噬细胞和致敏淋巴细胞迅速被激活 执行免疫功能 引起特异性免疫反应 释放淋巴因子是致敏淋巴细胞免疫功能之一 其中趋化因子(mcf)能吸引巨噬细胞及中性多核白细胞 使其趋向抗原
物质与致敏淋巴细胞相互作用的部位移动 巨噬细胞抑制因子(mif)能抑制进入炎症区的巨噬细胞和中性多核白细胞的移动 使它们停留在炎症或病原体聚集的部位 利于发挥作用 mif可使巨噬细胞发生粘着 并使吞噬反应显著增加 巨噬细胞激活因子(maf)主要作用是增加巨噬细胞的吞噬与消化能力 并加强巨噬细胞对抗原进行处理的能力 从而提高抗原的免疫原性作用 因此在结核菌侵犯的部位 出现巨噬细胞的凝聚 大量吞噬结核菌 在分枝杆菌生长抑制因子的作用下 还能抑制细胞内的结核菌生长 及至消化 最后消灭 形成结核的特异性免疫 在卡介苗进入机体后 引起特异性免疫反应的同时 还产生了比较广泛的非特异性免疫作用 这与t细胞产生的淋巴因子 t细胞本身的直接杀伤作用及体液免疫因素相互作用有关 2 现用于治疗恶性黑色素瘤 或在肺癌 急性白血病 恶性淋巴瘤根治性手术或化疗后作为辅助治疗 均有一定疗效
3 死卡介苗还用于预防小儿感冒 治疗小儿哮喘性支气管炎以及防治成人慢性气管炎 【不良反应】 接种2周左右出现局部红肿 浸润 化脓 并形成小溃疡 严重者宜采取适当治疗处理 接
种中偶可发生下列反应: 1 淋巴结炎症:接种后1-2个月左右 颈部 腋下 锁骨上下等淋巴结肿大(大于1.0cm) 反应过强者 淋巴结肿大明显 可形成脓疡或破溃 或在接种处有小脓疤 皮内注射者反应往往较
划痕法者强 另外旧结核菌素(ot)试验呈阳性者 接种后也可产生较强反应 2 类狼疮反应:与结核菌菌株剩余毒力有关 3 疤痕:因丰富的肉芽组织形成疤痕突起 有时呈疤痕瘤 多见于不作ot试验而直接皮上
划痕接种者 【禁忌症】
1 结核病 急性传染病 肾炎 心脏病 免疫缺陷症 湿疹或皮肤病患者 2 急性疾病 烧伤患者 疾病恢复期(疾病结束及健康恢复之间) 近期接种天花疫苗 泌
尿道感染患者 (国外资料) 3 由于使用下列药物或治疗而致免疫应答抑制:烷化剂 抗代谢药 放射治疗 类固醇 (国外资料) 4 由于下列疾病导致免疫应答降低:全身恶性肿瘤 hiv感染 γ干扰素受体缺陷 白血病 淋巴瘤 (国外资料) 5 由感染性疾病导致的发热或未知病因的发热不得使用卡介苗 (国外资料) 6 免疫力降
低的婴儿或儿童 (国外资料) 慎用 【注意事项】
1 安瓿有裂纹和过期失效者不可使用; 2 接种对象必须详细登记姓名、性别、年龄、住址,菌苗批号或亚批号、制造单位和接种日期;
3 接种的注射器应专用,不得用作其他注射,以防止产生化脓反应,使用时制品应注意避光。
4 接种后约2周局部出现红肿浸润、化脓、形成小溃疡,一般2-12周后结痂。 5 对患
有结核病、急性传染病、肾炎、心脏病、湿疹及其皮肤病、早产儿、难产儿禁用。 6 对已知免疫缺损或正在进行免疫抑制剂治疗及服用皮质类固醇、放射和抗代谢药物者
不应接种。 【药物相互作用】 1 免疫抑制剂(如环孢霉素 来氟米特 西罗莫司 他克莫司等):免疫抑制剂将导致免疫力
降低 施以活菌免疫接种后将导致严重甚至致命的感染 2 糖皮质激素:按常规 大剂量糖皮质激素(每日用量超过10mg强的松或等量的其它糖皮
质激素 连续2周以上)致免疫力抑制患者 不应接受减毒疫苗免疫 大量类固醇所致的免疫抑制会产生对减毒疫苗的不完全应答反应 但糖皮质激素低-中剂量 短期(小于14天)全身使用;局部使用;或低-中剂量 短效糖皮质激素长期替代治疗及关节内 囊内 跟腱糖皮质激素注射
不应视为疫苗接种的禁忌 替代疗法中类固醇剂量 诸如治疗阿迪森病 对免疫无抑制作用 3 茶碱:卡介苗接种能显著提高茶碱平均血浆半衰期 大多数患者会经历一个短暂和轻微
的血浆茶碱水平上升期 【贮藏方法】在2~8℃的暗处保存。有效期1年。篇五:异烟肼片说明书 异烟肼片 说明书 【药品名称】 通用名:异烟肼片 曾用名: 商品名: 汉语拼音:yiyanjing pian 英文
名:isoniazid tablets 化学名称:4-吡啶甲酰肼化学 结构式: 分子式:c6h7n3o 分子量:137.14
【性 状】 本品为白色片。 【药理毒理】 本品是一种具有杀菌作用的合成抗菌药,本品只对分枝杆菌,主要是生长繁殖期的细菌有效。其作用机制尚未阐明,可能抑制敏感细菌分枝菌酸(mycolicacid)的合成而使细胞壁破裂。
【药代动力学】 本品口服后迅速自胃肠道吸收,并分布于全身组织和体液中,包括脑脊液、胸水、腹水、皮肤、肌肉、乳汁和干酪样组织。并可穿过胎盘屏障。蛋白结合率仅0~10%。口服1~2小时血药浓度可达峰值,但4~6小时后血药浓度根据患者的乙酰化快慢而不一,快乙酰化者,t1/2为0.5~1.6小时,慢乙酰化者为2~5小时,肝、肾功能损害者可能延长。代谢主要在肝脏中乙酰化而成无活性代谢产物,其中有的具有肝毒性。乙酰化的速率由遗传所决定。慢
乙酰化者常有肝脏n-乙酰转移酶缺乏,未乙酰化的异烟肼可被部分结合。 本品主要经肾排泄(约70%),在24小时内排出,大部分为无活性代谢物。快乙酰化者中93%以乙酰化型在尿液中排出,慢乙酰化者为63%。快乙酰化者尿液中7%的异烟肼呈游离或结合型,而慢乙酰化者则为37%。本品易通过血脑屏障,亦可从乳汁排出,少量可自唾液、
痰液和粪便中排出。相当量的异烟肼可经血液透析与腹膜透析清除。 【适应症】 (1)异烟肼与其它抗结核药联合,适用于各型结核病的治疗,包括结核性脑膜炎以及其他分枝杆菌感染。
(2)异烟肼单用适用于各型结核病的预防: ①新近确诊为结核病患者的家庭成员或密切接触者; ②结核菌素纯蛋白衍生物试验(ppd)强阳性同时胸部x射线检查符合非进行性结核病,
痰菌阴性,过去未接受过正规抗结核治疗者; ③正在接受免疫抑制剂或长期激素治疗的患者,某些血液病或网状内皮系统疾病(如白血病、霍奇金氏病)、糖尿病、尿毒症、矽肺或胃切除术等患者,其结核菌素纯蛋白衍生物试
验呈阳性反应者; ④35岁以下结核菌素纯蛋白衍生物试验阳性的患者; ⑤已知或疑为hiv感染者,其结核菌素纯蛋白衍生物试验呈阳性反应者,或与活动性肺
结核患者有密切接触者。 【用法用量】 口服 预防:成人一日0.3g,顿服;小儿每日按体重10mg/kg,一日总量不超过0.3g,顿服。治疗:成人与其他抗结核药合用,按体重每日口服5mg/kg,最高0.3g;或每日15mg/kg,最高900mg,每周2~3次。小儿按体重每日10~20mg/kg,每日不超过0.3g,顿服。某些严
重结核病患儿(如结核性脑膜炎),每日按体重可高达30mg/kg(一日量最高500mg),但要注
意肝功能损害和周围神经炎的发生。 发生率较多者有步态不稳或麻木针刺感、烧灼感或手指疼痛(周围神经炎);深色尿、眼或皮肤黄染(肝毒性,35岁以上患者肝毒性发生率增高);食欲不佳、异常乏力或软弱、恶心或呕吐(肝毒性的前驱症状)。发生率极少者有视力模糊或视力减退,合并或不合并眼痛(视神经炎);发热、皮疹、血细胞减少及男性乳房发育等。本品偶可因神经毒性引起的抽搐。 【禁忌症】 肝功能不正常者,精神病患者和癫痫病人禁用。 【注意事项】 (1)交叉过敏反应,对乙硫异烟胺、吡嗪酰胺、烟酸或其他化学结构有关药物过敏者也可能对本品过敏。 (2)对诊断的干扰:用硫酸铜法进行尿糖测定可呈假阳性反应,但不影响酶法测定的结
果。异烟肼可使血清胆红素、丙氨酸氨基转移酶及门冬氨酸氨基转移酶的测定值增高。 (3)有精神病、癫痫病史者、严重肾功能损害者应慎用。 (4)如疗程中出现视神经炎症状,应立即进行眼部检查,并定期复查。 (5)异烟肼中毒时可用大剂量维生素b6对抗。 【孕妇及哺乳期妇女用药】 (1)本品可穿过胎盘,导致胎儿血药浓度高于母血药浓度。动物实验证实异烟肼可引起死胎,但在人类中虽未证实,孕妇应用时必须充分权衡利弊。异烟肼与其他药物联合时对胎
儿的作用尚未阐明。此外,在新生儿用药时应密切观察不良反应。 (2)异烟肼在乳汁中浓度可达12mg/l,与血药浓度相近;虽然在人类中尚未证实有问题,
哺乳期间应用仍应充分权衡利弊。如用药则宜停止哺乳。 【儿童用药】 严格按儿童用法用量使用。 【老年患者用药】 50岁以上患者用本品引起肝炎的发生率较高。 【药物相互作用】 (1)服用异烟肼时每日饮酒,易引起本品诱发的肝脏毒性反应,并加速异烟肼的代谢,
因此需调整异烟肼的剂量,并密切观察肝毒性征象。应劝告患者服药期间避免酒精饮料。 (2)含铝制酸药可延缓并减少异烟肼口服后的吸收,使血药浓度减低,故应避免两者同
时服用,或在口服制酸剂前至少1小时服用异烟肼。 (3)抗凝血药(如香豆素或茚满双酮衍生物)与异烟肼同时应用时,由于抑制了抗凝药
的酶代谢,使抗凝作用增强。 (4)与环丝氨酸同服时可增加中枢神经系统不良反应(如头昏或嗜睡),需调整剂量,
并密切观察中枢神经系统毒性征象,尤其对于从事需要灵敏度较高的工作的患者。 (5)利福平与异烟肼合用时可增加肝毒性的危险性,尤其是已有肝功能损害者或为异烟
肼快乙酰化者,因此在疗程的头3个月应密切随访有无肝毒性征象出现。 (6)异烟肼为维生素b6的拮抗剂,可增加维生素b6经肾排出量,因而可能导致周围神经
炎,服用异烟肼时维生素b6的需要量增加。 (7)与肾上腺皮质激素(尤其泼尼松龙)合用时,可增加异烟肼在肝内的代谢及排泄,导致
后者血药浓度减低而影响疗效,在快乙酰化者更为显著,应适当调整剂量。 (8)与阿芬太尼(alfentanil)合用时,由于异烟肼为肝药酶抑制剂,可延长阿芬太尼的作用;与双硫仑(disulfiram)合用可增强其中枢神经系统作用,产生眩晕、动作不协调、
易激惹、失眠等;与安氟醚合用可增加具有肾毒性的无机氟代谢物的形成。 (9)与乙硫异烟胺或其他抗结核药合用,可加重后二者的不良反应。与其他肝毒性药合
用可增加本品的肝毒性,因此宜尽量避免。 (10)异烟肼不宜与酮康唑或咪康唑合用,因可使后两者的血药浓度降低。
(11)与苯妥英钠或氨茶碱合用时可抑制二者在肝脏中的代谢,而导致苯妥英钠或氨茶碱血药浓度增高,故异烟肼与两者先后应用或合用时,苯妥英钠或氨茶碱的剂量应适当调整。 (12)与对乙酰氨基酚合用时,由于异烟肼可诱导肝细胞色素p-450,使前者形成毒性
代谢物的量增加,可增加肝毒性及肾毒性。 (13)与卡马西平同时应用时,异烟肼可抑制其代谢,使卡马西平的血药浓度增高,而
引起毒性反应;卡马西平可诱导异烟肼的微粒体代谢,形成具有肝毒性的中间代谢物增加。 (14)本品不宜与其他神经毒药物合用,以免增加神经毒性。 【规 格】 (1)50mg (2)100mg (3)300mg 【贮 藏】 遮光,密封,在干燥处保存。
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