13.答案 (1)PCR 设计引物 (2)C 转化 RNA聚合酶 (3)T淋巴 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器 (4)能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中
解析 (1)基因工程中,扩增目的基因利用的是PCR技术,但前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序
列,以便设计引物。(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用C 处理酵母菌,使酵母菌细胞处于感受态。白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。在表达过程中,启动子需与RNA聚合酶识别和结合,从而驱动转录过程。(3)在体液免疫过程中,白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的。细菌属于原核生物,细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器,因此为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而是使用酵母菌细胞作为受体细胞。(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点。图示过程获得有效表达的重组载体使用了EcoRⅠ和EcoR52两种限制酶,与使用单一的限制酶相比,其优点是能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中。
14.答案 (1)DNA双链复制 耐高温的DNA聚合酶(或Taq酶) 引物 (2)蛋白质空间结构较为复杂,改造困难;直接改造蛋白质不能遗传,改造了的基因能遗传 能生产出自然界不存在的蛋白质 蛋白质工程 (3)农杆菌转化法 植物细胞的全能性
解析 (1)PCR的原理是DNA双链复制;利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物;扩增过程是在较高温度下进行的,因此需要加入耐高温的DNA聚合酶(或Taq酶)。(2)蛋白质空间结构较为复杂,改造困难。直接改造蛋白质不能遗传,改造了的基因能遗传,因此蛋白质工程技术不直接改造Rubisco酶,而通过对Rubisco酶基因进行改造,从而实现对Rubisco酶的改造。和传统基因工程技术相比较,定点突变技术最突出的优点是能生产出自然界不存在的蛋白质,因此PCR定点突变技术属于蛋白质工程的范畴。(3)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;将转基因植物细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术,原理是植物细胞具有全能性。
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