探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化

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§探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化

一． 材料用具：酵母菌贮用培养液、无菌葡萄糖溶液、血细胞计数板、盖玻片、移液管、

滴管、有螺旋盖的试管、试管架、记号笔、直尺、坐标纸、比浊计（比色计）、显微镜。 二． 材料简介：

1. 选用酵母菌的原因：1.酵母菌是单细胞真核生物；

2.生长周期短，繁殖速度快，世代间不重叠。 2.血球计数板：

具体操作方式：用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区，盖上盖玻片，

让培养液自行渗入。（多余的培养液用滤纸吸去）

★计数板：

五点取样法 1个大方格=16个中方格

=400个小方格（16×25）

3.比浊计（比色计）：测定溶解度。

三.实验步骤 Ⅰ

. 配置样品并分组（配置2个样品）：用记号笔标记有螺旋盖的试管A、B；

A组（10mL无菌葡萄糖溶液+0.1mL酵母菌贮用培养液）

B组（10mL无菌葡萄糖溶液）

;.

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注：酵母菌可以用液体培养基培养。

Ⅱ. 细胞计数（抽样检验方法）

1.拧紧试管盖将试管A轻轻震荡几次（目的：使酵母菌分布均匀，减少误差）。

2. 用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区，盖上盖玻片，让培养液自行

渗入。静待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在显微镜的载物台上，计数一个小方格内的酵母菌数量。 3.试管B重复该步骤； 4.样品2重复2、3。 ★计数注意事项：

细胞总数计算方法： 每方格内细胞数（细胞数÷方格数）×2500×10

2500：每方格体积=2mm×2mm×0.1mm=0.4mm2 1mL=1cm2=1000mm2

1000÷0.4=2500个（每毫升方格数） 10：一试管大约为10mL。

盖 1.计数顺序：左上 右上 右下 左下；

2.压在方格线上的细胞，只计左线和上线上的细胞数； 3.细胞间若有粘连（死亡），则数出团块中的每一个细胞；

4.出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2，则算独立个体。

芽体

出芽生殖——无性生殖

5.用比浊计测定各试管的浑浊程度（探究酵母菌数量变化与其浑浊度之间的关系） 6.记录数据，求平均值 时间 ;.

1 2 3 4 5 6 7 ..

组别 样品1 样品2 平均

Ⅲ.培养

1.第2天，重复1-5，在坐标纸上标记当天样品的浑浊度读数与酵母数。用直尺连接两

个标记点，依据此线的延长线估算此后两天的酵母数量。 2.第4和第7天进行计数，每天用比浊计测定混合度并记录。（也可每天计数） ★注：1.每天计数酵母菌的时间要固定；

2.若方格内细胞数目多于300个或数不过来，则稀释（详见书P73）

Ⅳ.整理数据，绘制种群数量变化曲线 105~109

图一.酵母菌数量变化及其浑浊度的关系（横坐标：浑浊度（0~100）；纵坐标：细胞数）

图二.酵母菌种群数量随时间变化曲线（横坐标：时间/天；纵坐标：细胞数）

★图表分析：1.A曲线：趋于平稳——营养成分减少，种内斗争加剧；

下降：细胞代谢毒素增加，使细胞死亡（死亡率＞出生率）

;.