_______________________________________。
（2）调制水果酵素饮料所用的胡萝卜素，通常采用___________法萃取，理由是________________________。
（3）调制水果酵素饮料所用的茉莉芳香油的提取流程如下：茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→过程B→过滤→茉莉油。过程A的方法是_____________，过程B的目的是_______________。
【答案】 (1). 去除杂菌（或消毒） (2). 酵母菌先进行发酵生成乙醇，然后醋酸菌将乙醇变为醋酸 (3). 萃取 (4). 胡萝卜素易溶于有机溶剂 (5). 水蒸气蒸馏 (6). 除水
【解析】试题分析：本题考查果酒、果醋的制作、植物有效成分的提取，考查对果酒、果醋制作原理、芳香油和胡萝卜素提取原理与步骤的理解和识记。解答此题，可根据胡萝卜素、芳香油的不同特点选择不同的提取方法。
（1）接种活菌前，将水果果汁煮沸可消灭杂菌；在发酵的过程中，酵母菌先进行发酵生成乙醇，然后醋酸菌将乙醇变为醋酸，所以先出现酒味后出现醋味。 （2）胡萝卜素易溶于有机溶剂，通常采用萃取法提取。
（3）芳香油难溶于水，能随水蒸气一同蒸馏，所以常用过程A水蒸气蒸馏法提取，过程B加入硫酸钠，利用硫酸钠容易吸水的特性可除去分离后油层中的水分。
12. 转基因抗虫棉的培育过程如图所示。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因（阴影表示）与质粒上有PstI、SmaI、EcoRI、ApaI等限制酶的切割位点（箭头所示），质粒上还有唯一标记基因——抗卡那霉素基因（阴影表示）。有人通过实验，获得的农杆菌细胞有的未被转化，有的被转化。被转化的农杆菌细胞有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的农杆菌。请据此回答：
（1）构建含抗虫基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是________，对________进行切割。 （2）若抗虫蛋白分子是由m条肽链组成的，控制其合成的基因含n个碱基对，氨基酸的平均分子质量为g，则抗虫蛋白的分子质量最大约为__________（不考虑终止密码）。
（3）如果用含有卡那霉素的培养基进行筛选，在上述四种农杆菌中，未被转化的和仅含环状目的基因的农杆菌是不能区分的，其原因是_____________________________________；并且________________的农杆菌也是不能区分的，其原因是___________________________。 【答案】 (1). SmaI、ApaI (2). 目的基因（或含抗虫基因的DNA）、质粒 (3). ng/3－18（n/3－m） (4). 二者均不含有卡那霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 (5). 含有质粒载体、重组质粒 (6). 二者均含有卡那霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 【解析】试题分析：本题主要考查基因工程、基因的表达。要求学生熟知限制酶的选择、培养基的选择、以及基因表达中的计算。
（1）若采用PstI切割，会破坏抗虫基因；若采用EcoRI切割，会破坏质粒中的唯一标记基因；因此构建含抗虫基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是SmaI、ApaI。对目的基因和质粒进行切割。
（2）控制其合成的基因含n个碱基对，则mRNA中的碱基为n，氨基酸数目为n/3，则抗虫蛋白的分子质量最大约为氨基酸的分子质量-水的分子质量，即ng/3－18（n/3－m）。 （3）由于未被转化的和仅含环状目的基因的农杆菌均不含有卡那霉素抗性基因，用含有卡那霉素的培养基进行筛选，均不能生长，则无法区分。而含有质粒载体、重组质粒均含有卡那霉素抗性基因，用含有卡那霉素的培养基进行筛选，均能正常生长，因此也不能区分。
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