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金榜原创·高考预测
预测点1.基因工程的工具
1.DNA是丰富多彩的生命现象的“剧本”。现在人们借助生物科学技术可以对“剧本”进行“拷贝”或“改编”。据图回答下列问题：
(1)催化①过程的酶是________，经①过程产生的DNA片段末端的形式为________。
(2)催化②过程的酶是________，与催化①过程的酶相比较，该酶的专一性________(填“较强”或“较弱”)。
(3)催化③过程的酶是________，实现该过程还可以采用的方法是________。 (4)催化④过程的酶是________，该过程体现了DNA复制的__特点。
【解析】(1)通过①过程，DNA分子被切成具有黏性末端的DNA片段，该过程由限制酶催化。
(2)通过②过程，具有黏性末端的DNA片段被连接在一起，该过程由DNA连接酶催化。限制酶识别并切割特定的核苷酸序列，具有较高的专一性。
(3)使DNA双螺旋结构解开，可以使用解旋酶，也可以通过加热的方法，二者均可打开双链之间的氢键。
(4)DNA子链的延伸需要DNA聚合酶参与，该过程体现了DNA复制的半保留复制、
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边解旋边复制的特点。 答案：(1)限制酶 黏性末端 (2)DNA连接酶 较弱 (3)解旋酶 加热
(4)DNA聚合酶 半保留复制、边解旋边复制 预测点2.基因工程的基本程序
2.启动子探针型载体是一种有效、经济、快速分离基因启动子的工具型载体，其结构如图所示，据图回答下列问题：
(1)限制性核酸内切酶的作用特点是____________________________________ ____________________________________________________。
(2)将切割产生的DNA片段群体与无启动子的探针载体重组，需要用________。 (3)若把重组混合物转化给大肠杆菌，为提高转化效率，常用的方法是________。 (4)若插入片段中所含的编码区序列的碱基对数目不能被3整除，报告基因能否正常表达？为什么？_________________________________________________ ____________________________________________________。
(5)若克隆位点插入了启动子序列，且其中不含编码区序列，但报告基因仍不能正常表达，可能的原因是_____________________________________________
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____________________________________________________。 【解析】本题主要考查基因工程的工具和操作方法。
(1)限制性核酸内切酶具有酶的专一性，能识别并切割特定的脱氧核苷酸序列。 (2)将切割产生的DNA片段群体与无启动子的探针载体重组，可以用DNA连接酶连接二者之间的黏性末端。
(3)Ca2+可以增大细胞壁的通透性，提高转化效率。
(4)mRNA中相邻的三个碱基决定一个氨基酸，若插入片段中所含的编码区序列的碱基对数目不能被3整除，则与之相连的报告基因不能编码出正确的氨基酸序列，即不能正常表达。
(5)启动子插入克隆位点时有两种插入方向，若插入方向错误，则报告基因不能正常表达。
答案：(1)识别并切割特定的脱氧核苷酸序列 (2)DNA连接酶
(3)用Ca2+处理，以增大细胞壁的通透性
(4)不能。mRNA中相邻的三个碱基决定一个氨基酸，若插入片段中所含的编码区序列的碱基对数目不能被3整除，则报告基因不能编码出正确的氨基酸序列 (5)启动子插入方向不正确 预测点3.基因工程的应用
3.chlL基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为了研究该基因对叶绿素合成的控制，需要获得chlL基因不能正常表达的蓝藻细胞。如图是通过基因工程获得无chlL基因蓝藻细胞的技术流程。
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(1)质粒的化学本质是________。
(2)图中不涉及碱基互补配对的过程是________。
(3)图中无chlL基因蓝藻细胞的产生，来源于可遗传变异中的________。请给出不同于上述途径获得chlL基因不能正常表达蓝藻细胞的思路是________。 (4)chlL基因控制性状的途径是_________________________________________ __________________________________________________。
(5)叶绿素中含有的一种金属元素是________，可以用________的培养基筛选无chlL基因的蓝藻细胞。
(6)将红霉素抗性基因与质粒直接连接得到的重组质粒导入蓝藻细胞，得到无chlL基因蓝藻细胞的效率极低，而将重组质粒2导入蓝藻细胞，得到无chlL基因蓝藻细胞的效率较高，据图推测其原因可能是__________________。 【解析】本题主要考查基因工程的应用。
(1)质粒的化学本质为环状DNA，具有自我复制的特点，所以可以作为目的基因的载体。
(2)图中①②过程黏性末端的碱基通过氢键互补配对。③过程不涉及碱基互补配对。
(3)基因工程技术依据的原理是基因重组。通过诱变育种也可以获得chlL基因不能正常表达的蓝藻细胞。
(4)叶绿素不是蛋白质，因此chlL基因控制性状的途径是通过控制酶的合成控
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