API20E对致病微生物检测应用

API20E对致病微生物检测应用

API20E对致病微生物检测应用 健康必读杂志2010年7月第7期Healthmum—readMag~ine2010JulvN01.17

..曩药物与临床

AOI20E对致病微生物检测应用 张海艳

【中图分类号】R155【文献标识码】A【文章编号】1672—3783(2010】07—0221

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【摘要】本实验用API2oE和出入境行业检验标准(sN标准)~-65株食品中可疑茵

总结了API20E在食品常见致病菌 进行检测, 检测中优缺点.

【关键词】API20E,致病微生物,检测

沙门氏菌,志贺氏菌,耶尔森氏菌,霍乱弧 大肠杆菌,

菌,副溶血性菌等都是法定检验的致病菌,每一种致病菌都有 一

套不同的检验标准,对于基层的检验实验室来说,不但操作 程序复杂,而且要拥有品种繁多的生化试剂,另外还要耗费漫 长的检验时间,如大肠杆菌的检测,按照SN0168—92标准,从 开始到最后检大肠杆菌需要10天左有的时间.

API细菌鉴定系统为国际公认标准(细菌)鉴定系统.本 研究用API20E分别测试大肠杆菌,沙门氏菌,霍乱弧菌,副溶

并用出入境行业检验标准的相应标准(sN 血性菌一些可疑样品,

标准)进行对照试验,总结了API20E在基层食品实验室检测中 的一些经验.

1样品,材料和仪器

1.1样品来源样品来自各进出口公司送检食品中分离得到 的可疑菌株,其中可疑大肠杆菌24株,沙门氏菌16株,可疑霍 乱弧菌7株,可疑副溶血性弧菌18株.

1.2SN法鉴定用的培养基和生化试剂均为北京陆桥技术有 限责任公司产品. 1.3API20E生化反应板及相关试剂为法国生物梅里埃公司 的产品. 2检验依据

2.1各致病菌SN检验依据

大肠杆菌检验方法:SN0169—9211].沙门氏菌检验方法: SN0170—92121.霍乱弧菌检验方法:SN/T1022—200113].副溶血 性弧菌检验方法:SN0173—92【4】.

2.2各致病菌API20E检验依据

API20E法的操作按厂家规定的操作方法程序执行. API20E法检测步骤【5】:(1)从分离平板挑取可疑单菌落 制成菌悬液(可疑弧菌的用0.85%的生理盐水,其余的用蒸馏 水),按操作说明书指导分别滴加于API20E试剂条各个微量生 化管内,37%培养24h?2h.(2)滴加附加试剂,判断各生化 管的反应结果是阳性还是阴性,并转化成相关的读数.(3) APILAB软件分析得出最终结果.

3结果

API20E检出大肠杆菌15株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株, 副溶血性弧菌3株; 作者简介:张海艳(1978.12一),女,硕士,主要从事病 原微生物教学和研究. 具体检测结果如下:

表1大肠杆菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:大肠杆菌:%id为95.8,T值为0.6, 好的鉴定结果.

表2沙门氏菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:甲型副伤寒沙门氏菌:%id为99 5,T值为1,很好的鉴定结果.

表3副溶血性弧菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:副溶血性弧菌:%id为98.4,T值为 0.92,好的鉴定结果.

表4可疑霍乱弧菌样品(实际为创伤弧菌)在 API20E试条中的生化反应结果

APILAB软件分析结果为:创伤弧菌:%id为99.7,T值为1.00, 很好的鉴定结果. SN法检出大肠杆菌l5株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株,副 溶血性弧菌3株;两种检测方法结果完全一致.

4讨论

通过实验,我们对比了2种不同的检验方法优劣,发现API 20E在基层食品检测实验室的检验存在很大的优势. 优势:1不需高昂的仪器设备,仅需试剂条和一套软件, 基层实验室一般都能满足要求.优势2所需耗材种类少.SN法 中的生化培养基,种类繁多,费时费力,不易保存,对于基层 的检验实验室来说,不但要拥有品种繁多的生化试剂,而且操 作程序复杂,较难掌握.API20E用一种试剂条就可以检验肠 杆菌科和弧菌等多种食品常见致病菌,所需耗材简单.优势3 可鉴定多种致病菌.API20E是肠杆菌科和其它G一杆菌和弧菌 的标准鉴定系统,它可以用一种鉴定条来鉴定大肠杆菌,沙门 氏菌,志贺氏菌,耶尔森氏菌,霍乱弧菌,副溶血性菌等不同 的致病菌,而在国家标准(GB)和入境检验检疫行业标准 fsN)中每一种检验标准只能检验一种致病菌.优势4鉴定结果 和SN方法一致,分析更全面,详尽.API20E包含了SN法的绝 大部分生化反应,这保证了API20E的结果与SN法的结果是一 致的.此外还增加了SN法没有的一些生化反应,总生化鉴定反 .

应达N21种,加上API检索工具(APILABPlus分析软件), 分析更全面,详尽,能判断很多非典型鉴定模式,往往能直接

鉴定到亚种或型,而SN法只能鉴定出\是\或\非\某种细 菌.优势5所需时间短,在处理如食物中毒等突发事件时,可 以在较短的时间内得到结果.在食物中毒等突