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(5)植物组织培养技术不仅应用于花卉、果树的快速、大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于____________________、__________________、______________等育种过程中。 答案 (1)这些部位很少受到病毒等病原体的侵害 (2)脱分化和再分化 (3)愈伤组织 细胞分裂 (4)染色体结构与数目
(5)植物体细胞杂交育种 基因工程育种 单倍体育种
解析 (1)作物脱毒是利用茎尖等组织细胞不含或极少含病毒的原理。(2)植物激素在植物组织培养中的作用是启动细胞分裂，在脱分化和再分化过程中起关键作用。(3)细胞产物的工厂化生产并没有利用细胞的全能性原理将离体细胞培养成完整植株，而是对愈伤组织进行培养产生大量的细胞产物。(4)题中提示显微镜观察发现的异常为染色体变异，包括数目和结构的变异。(5)植物细胞工程在育种方面的应用有植物体细胞杂交育种、基因工程育种、单倍体育种以及体细胞诱变育种等。
27．(12分)通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势(甲耐盐、乙高产)，培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：
(1)A是________________酶，D是具有________优良性状的幼芽。D长成的幼苗需要选择的原因是______________________________________。
(2)由C形成植株的过程利用了________________技术，愈伤组织形成D需要经过________过程。整个培养过程要在________的条件下进行。
(3)植物体细胞融合成功的标志是__________________。这项新技术在_____________________等方面具有重要意义。
(4)已知甲、乙植物分别为四倍体、二倍体，则“甲—乙植株”属于________倍体植株。
答案 (1)纤维素酶和果胶 耐盐 有耐盐高产和耐盐不高产两种幼苗 (2)植物组织培养 再分化 无菌 (3)再生出新的细胞壁 克服远缘杂交不亲和的障碍 (4)(异源)六
解析 (1)由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。两个原生质体经PEG诱导后融合，再生出细胞壁后变成杂种细胞，利用植物组织培养技术可得到愈伤组织、丛芽结构和试管苗，并非每个细胞都能表达出耐盐性状，需要利用含盐培养基进行选择。(2)C细胞是杂种细胞，形成植株需要利用植物组织培养技术，经历细胞的脱分化和再分化过程。过程中涉及培养基培养过程，所以无菌操作非常重要。(3)植物细胞融合时，核质应该都进行融合，当细胞壁再生时，说明融合后的细胞核与细胞质已经进行正常的新陈代谢了，即融合成功。植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。(4)“甲—乙植株”属于异源多倍体里面的异源六倍体。
28．(8分)如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培
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养)，请据图回答下面的问题：
(1)OA段的培养称为__________培养，AB段可能发生了________________现象，需要用______________酶处理使组织细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行________________，不同的是植物细胞还要进行____________________。
(3)为制备单克隆抗体，需将________注射到小鼠体内，以此获取________________细胞，同时可选取图中________点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取的细胞，其细胞膜上的______________比正常细胞显著减少，为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用________培养基达到目的。
答案 (1)原代 接触抑制 胰蛋白 (2)增殖或分裂 脱分化和再分化 (3)抗原 已免疫的B淋巴 D 糖蛋白 选择性
解析 动物组织消化后的初次培养称为原代培养，分瓶后的培养称为传代培养；当动物细胞表面相互接触时，会发生接触抑制现象。动植物细胞培养都必然发生细胞增殖，从而使细胞数目增多；另外，植物组织培养一般都可以发生脱分化和再分化的过程。制备单克隆抗体时，需要将产生单一抗体的B淋巴细胞与能够无限增殖的细胞杂交。欲获得B淋巴细胞必须先注射抗原，检测到有相应抗体的存在才可以提取到相应的B淋巴细胞，而癌细胞表面的糖蛋白减少，黏着性降低，近似球形，易于扩散。筛选一般用选择性培养基来进行。
29．(10分)美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛，年产奶量达30.8 t，我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4 t。某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛(如图)，请据图回答下列问题：
(1)目前完成①的方法有__________________________、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等。 (2)③
过
程
中
选
择
去
核
卵
母
细
胞
作
为
受
体
细
胞
的
原
因
是
____________________________________________________________________________。 (3)④过程所利用的技术是________________________，其原理是____________。
(4)该实验的成功说明已分化的耳朵细胞的细胞核中含有与____________一样的全套基因，这种繁殖方式属于
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__________。
(5)若研究发现该高产奶牛线粒体发达，故它的产奶量高，则小牛d成年后具有这一优良性状吗？________。 你的依据是____________________________________________________________。
答案 (1)显微操作去核法 (2)卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质 (3)动物细胞培养(早期胚胎培养) 细胞增殖 (4)受精卵 无性繁殖 (5)不具有 线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，而小牛d的细胞质主要来自于奶牛a
解析 (1)去核的方法有显微操作去核法、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等方法。(2)在核移植中常用去核卵母细胞作为受体细胞，是因为卵母细胞内含有丰富的营养物质；体积比较大，容易操作。(3)④过程属于动物细胞培养，其原理是细胞增殖。(4)该实验的成功证明了动物细胞核具有全能性，因为细胞核中含有和受精卵一样的全套基因。(5)线粒体位于细胞质中，主要来源于受体细胞，因此小牛d没有产奶量高的优良性状。
30．(10分)在ABO血型系统中，A型血和B型血人红细胞膜表面分别含有凝集原A、B，AB型血人红细胞膜表面同时含有凝集原A和B，O型血人红细胞膜表面没有凝集原。下图是利用动物细胞融合方法制备人抗A凝集原抗体的过程，请回答下列问题：
(1)要制备人抗A凝集原抗体，应向小鼠体内注射________________细胞，使小鼠产生________免疫。从小鼠体内分离的细胞①为________细胞。
(2)为诱导细胞①与骨髓瘤细胞融合，常选用________________作为诱导剂。融合后的培养液中存在多种杂交细胞和未融合细胞，需要进行________培养、克隆化培养和________，才能获得需要的杂交瘤细胞。
(3)杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因而既能在体外培养条件下________________，又能产生________________。
(4)制备的人抗A凝集原抗体能与______________发生特异性结合，若该抗体与待测血液样本呈阳性反应，则待测样本的血型是____________。
答案 (1)A型(或AB型)血人的红 特异性(或体液)
B淋巴(浆) (2)聚乙二醇(或灭活的病毒) 选择 抗体检测 (3)迅速大量繁殖 专一的抗体 (4)凝集原A A型或AB型
解析 (1)A凝集原存在于人的红细胞膜上，要制备人抗A凝集原抗体，应向小鼠体内注射A型或AB型血人的红细胞，使小鼠产生体液免疫，再从小鼠体内分离出能产生抗A凝集原抗体的B淋巴(浆)细胞。(2)诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，常选用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂。融合后的培养液中存在多种杂交细胞和未融合细胞，需要进行选择培养、克隆化培养和抗体检测，最终获得需要的杂交瘤细胞。(3)杂交瘤细胞具有双亲细胞的特点，既能在体外培养条件下迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。(4)人抗A凝集原抗体能与凝集原A发生特异性结合，A型或AB型血人的红细胞含有A凝集原，会与该抗体呈阳性反应。
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