孕妇血清IgG抗体效价检测操作规程
[样本要求]：血样标本最好采用EDTA抗凝（也可以用枸橼酸钠等抗凝），用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。 [样品准备]：
试剂配制：用985ulPH7.4的PBS(或者生理盐水)溶解15ul二巯基乙醇（2-Me）,即为0.2M(2-Me)应用液,密封，避光，置2---6℃保存.
红细胞标本的制备：用生理盐水配置红细胞悬液，红细胞最终浓度为1%左右.
血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心取上清;或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃放置2小时后离心,2000Rpm,10分钟,取上清.该上清不得有絮状物或沉淀；
[配套试剂]：孕妇IgG抗体效价卡， 标准A、B、O红细胞（取决于父亲血型）， 0.2M(2-Me)应用液 [实验步骤]
1、 试剂卡室温平衡，
离心一次，标记编号；
2、 配制中和血浆：先取待检者血浆200微升与生理盐水600微升做4倍稀释，然后取稀释后的标本和
0.2M巯基乙醇(2-Me)应用液各200ul，混匀，37℃孵育30---60分钟，（充分破坏标本中IgM类抗体） 既得到孕妇的中和血浆。
3、 将孕妇的中和血浆用生理盐水倍比稀释 效价 中和血浆（ul） 生理盐水（ul） 1：64 200 1400 1：128 200 200 1：256 200 200 1：512 200 200 1：1024 200 200 1：2048 200 200 4、 在所有孔中加入50ul健康人O型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体)或所有孔
中加入50ul健康人A型或B型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统IgG血型抗体)，然后加入上述表格中稀释的中和血浆各50ul
5、 把加有血浆和红细胞的微柱卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟； 6、 用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟1500r/min3分钟）。判定结果。 [结果判定] 效价值：产生3+凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 [参考值]
1、 RH系统抗体效价16有临床意义 2、 ABO系统抗体效价64有临床意义
[注意事项]
1.据文献报道微柱凝胶法检测出的母体效价值比常规聚凝胺和抗人球蛋白试管法高出1-2个滴度 （根据P.L.Mollison所著教材《临床医学中的输血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）》） 2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
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