银鲳不同消化器官中消化酶活性的分布及其比较
周健恺1, 徐善良2*, 邱成功1, 方增冰1, 陈 苹1
【摘 要】摘要:为了解野生与养殖条件下银鲳不同消化器官中消化酶活性的分布, 比较研究了野生银鲳成鱼和养殖银鲳幼鱼的消化酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)活性. 结果表明: (1)成鱼胃中蛋白酶活性最大, 为 0.47U·mg-1, 侧囊中蛋白酶活性最小, 仅有 0.05U·mg-1; 成鱼肝中淀粉酶活性最大,为0.08U·mg-1, 直肠最小, 为0.01U·mg-1; 肝的脂肪酶活性最大, 为10.63 U·mg-1, 中肠最小, 肝脂肪酶活性约为中肠的9倍. (2)幼鱼三种消化酶活性均为: 胃>肝>侧囊, 且银鲳幼鱼各消化酶活性总体上高于成鱼, 幼鱼胃中蛋白酶活性、淀粉酶活性、脂肪酶活性分别约为成鱼胃的3倍、12倍和1.5倍. (3)银鲳成鱼和幼鱼的A/P值都小于1, 且幼鱼各消化器官的A/P值都大于成鱼, A/P值结果表明银鲳为偏肉食性鱼类, 野生的成鱼比养殖的幼鱼更适应肉食性. 此外, 研究还发现银鲳的脂肪酶活性明显高于许多常见海水性鱼类, 推断其对脂肪的利用效率较高, 可以考虑在银鲳饲料的配制时适当提高饲料中脂肪的比例. 【期刊名称】宁波大学学报(理工版) 【年(卷),期】2014(000)004 【总页数】6
【关键词】银鲳; 成鱼; 幼鱼; 消化酶; 活性分布
银鲳(Pampus argenteus)隶属鲈形目(Perciformes), 鲳科(Stromateidae), 鲳属(Pampus), 俗称车片鱼、白鲳、鲳鱼等, 为近海暖温性鱼类, 生长快、个体大、肉质细嫩鲜美, 广泛分布于我国沿海、波斯湾、阿拉伯海和印度洋等地区, 具有很高的经济价值[1]. 近年来, 由于过度捕捞, 其资源量已显著降低[2], 因此, 迫切
需要发展银鲳的人工养殖,然而, 银鲳饲料问题一直是银鲳养殖过程中遇到的一个瓶颈, 也是当前的研究热点之一. 从研究银鲳的消化生理入手, 是解决这一难题的途径之一.
消化酶活性是反映鱼类消化生理机能的一项重要指标, 也是配合饲料研制的科学依据. 国内外对鱼类消化酶活性的研究报道较多[3-5]. 但是, 目前对银鲳的研究主要还是集中在对其营养成分分析[6-8]、银鲳繁殖生物学等方面[9-11], 对银鲳消化酶的研究也有涉及[12-13], 但尚未见其成鱼与幼鱼消化酶的比较. 有研究认为对幼鱼和成鱼消化酶活性差异的研究有助于了解鱼类摄食、消化器官的发育, 以及解决从幼鱼到成鱼养殖生产中的饲料配制和投饲等问题[14]. 因此, 笔者以银鲳野生成鱼和养殖幼鱼为实验材料, 比较了银鲳成鱼和幼鱼的消化酶在不同消化器官中的活性, 旨在了解两者间的差异, 为银鲳配合饲料研制及优化养殖投饲技术提供理论依据.
1 材料和方法
1.1 试验材料
银鲳成鱼于2012年8月捕获于浙江舟山海域(N29°30′, E122°30′), 取样5尾, 平均体长(18.1±2.8) cm, 平均体重(213.7±9.4)g. 在船上直接进行活体解剖, 于冰盘上将其消化系统的各个部分(侧囊、食道、胃、盲囊、中肠、后肠、肝)逐一仔细分离, 用预冷的生理盐水反复冲洗后存入离心管, 超低温保存在液氮罐中待测.
银鲳幼鱼饲养于浙江省海洋水产养殖研究所洞头基地, 取样 50尾, 平均体重(2.61±1.05)g, 平均体长(4.70±0.22)cm. 养殖水温为 25~27℃, 每天投饵3次, 饲料为“鱼宝”饲料和马鲛鱼鱼肉按1:1配制而成. 经测定, 饲料干物质中含粗
脂肪 6.4%,粗蛋白61.93%, 灰分13.02%, 幼鱼采样前1d停食.由于幼鱼尚小, 肠道较难完整分离, 仅分离测定侧囊、胃和肝3个组织, 其他取样方法同上, 也放入液氮罐中低温保存. 1.2 酶液制备
将用液氮保存的银鲳成鱼和幼鱼的消化器官组织分别取出, 于低温下解冻, 用预冷的生理盐水冲净, 然后加入4倍体积预冷生理盐水, 匀浆后用冷冻离心机于4℃, 2500 r·min-1条件下离心10 min,取上清液置于4℃下保存, 24 h内测定完毕.
1.3 酶活力测定 1.3.1 蛋白酶
采用福林-酚试剂法[15]测定蛋白酶. 在pH 7.5和底物酪蛋白质量浓度为 1.0mg·mL-1的反应条件下, 40℃水浴20min, 以酶液每1min内水解酪蛋白产生1μg酪氨酸作为1个酶活力单位(U). 1.3.2 淀粉酶
采用碘-比色法[16]测定淀粉酶. 在37℃水浴和pH 7.5的反应条件下反应7.5min, 以酶液每1min内水解淀粉产生1μg葡萄糖作为1个淀粉酶活力单位(U).
1.3.3 脂肪酶
采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法[15]测定脂肪酶. 在pH 7.5和30℃水浴的反应条件下, 以酶液每1min水解脂肪产生1μg脂肪酸作为1个酶活力单位(U). 1.4 鱼类A/P值
A/P值为淀粉酶比活力/蛋白酶比活力的值, 其可作为鱼类摄食食性和营养状况
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