2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
[课时作业]
一、选择题
1．在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是( ) A．使动物组织分散为单个细胞 B．去掉细胞壁，使其成为原生质体
C．去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合 D．促进蛋白质水解为多肽
解析：在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。
答案：A
2．一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件( ) ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③培养液中需加血浆
④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥加CO2维持培养液的pH A．①②③④⑤⑥ B．①②③④ C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥
解析：动物细胞体外培养要求环境无菌、无毒，在细胞培养液中要添加血清、血浆等一些天然成分，培养温度一般与动物体温相近。动物细胞培养还需要O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2可维持培养液的pH。
答案：D
3．下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．动物细胞培养的目的就是获得大量的分泌蛋白
B．对动物组织块和分散的细胞进行培养，效果是基本相同的 C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D．培养高度分化的动物体细胞一般不能发育成幼体
解析：获得大量的分泌蛋白仅仅是动物细胞培养应用的一个方面。分散的动物细胞比组织块更容易培养。细胞遗传物质的改变发生在传代培养中。
答案：D
4．用动植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是( ) A．都需用CO2培养箱 B．都需用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性
解析：动植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行。动物成体的体细胞离
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体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性；植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。动物细胞培养需要用CO2培养箱，但植物细胞培养不需用CO2培养箱。
答案：C
5．下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是( ) A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液 D．动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会衰老死亡
解析：动物细胞培养的过程是：先制备培养液，然后取动物细胞，用于培养的细胞大都来自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织；将组织取出后，用胰蛋白酶等处理使组织分散成单个细胞，将单个细胞配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将悬浮液放入培养瓶中在培养箱中培养；细胞在培养瓶中贴壁生长，细胞的数目越来越多，需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，再配制成悬浮液，分到两个瓶中继续培养。50代以后生存下来的细胞的遗传物质发生了变化，也就是说细胞发生了癌变，癌细胞会无限增殖。
答案：D
6．某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养，下列叙述正确的是 ( )
A．制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理 B．肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸 C．为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D．用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长
解析：制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2维持培养液pH。为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。
答案：D
7．下列关于动物细胞培养的过程叙述，错误的是( ) A．制作细胞悬浮液时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B．悬浮液中分散的细胞很快贴附在细胞壁上，细胞贴壁体现了细胞的适应性 C．细胞进行有丝分裂数量增加到接触时，可以使用胃蛋白酶处理后分瓶培养 D．10代以内的细胞保持细胞正常的二倍体核型
解析：胃蛋白酶在pH＝7时就会变性失活，而细胞培养的pH一般是7.2～7.4。 答案：C
8．下列关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是( )
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A．目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体 B．动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜 C．用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞
D．用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制 解析：动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得动物个体；用于核移植的供体细胞一般是10代以内的细胞；克隆动物细胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细胞核的动物一致，因此可有选择地克隆某一性别的家畜；克隆动物细胞质内的遗传物质主要来自受体卵母细胞，并不是对体细胞供体动物进行100%的复制。
答案：B
9．乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一匹小马。下列叙述正确的是( )
A．直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎 B．小马的性状与甲马完全相同 C．此项技术可用于保护濒危物种
D．该过程可以很好地证明动物细胞的全能性
解析：克隆过程中细胞质遗传物质来自一方，而细胞核中遗传物质来自另一方，所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能说明动物细胞核具有全能性，而不能证明动物细胞的全能性。
答案：C
10．中科院动物研究所与福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列描述与克隆无关的是( )
A．“复制” B．无性繁殖 C．组织培养 D．基因工程
解析：克隆是一种无性繁殖方式。子代与亲本相同，因而也可以认为是由亲本“复制”而来的；该过程需采用组织培养技术，但与基因工程无关。
答案：D
11．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是( )
A．将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体 D．将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
解析：野驴的体细胞的全能性已经受到限制，不能经过培养形成新个体；将野驴的一个
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基因导入家驴的受精卵中，培育成的是带有野驴基因的家驴；野驴的体细胞核中具有发育成野驴的全部基因，因此通过核移植技术，可使野驴“复生”。
答案：C
12．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，从该图提供的信息不能获得的结论是( )
A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B．有无血清对正常细胞培养的影响不同 C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养 D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
解析：从图中可以看出，随着培养时间的延长，癌细胞的数量比正常细胞显著增多，因此正常细胞与癌细胞的增殖速率不同。从图中还可以看出，有无血清对正常细胞培养影响很大，而对癌细胞影响不大，因此在培养基中补充血清对正常细胞的培养有利，而对癌细胞的培养，有无血清其结果都一样，都是快速增殖。
答案：A 二、非选择题
13．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列问题：
(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
(2)用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是
_________________________________________________________________________________________。
(3)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________，此外，细胞增殖还表现出________和接触抑制等特点。
(4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)上述动物细胞工程中涉及的技术有________________________。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。
解析：(1)实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其分离开来。(2)传代10代以内的细胞代谢旺盛、分裂能力强，遗传物质没有发生改变，适于作为核移植的供体细胞。(3)在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。(4)去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。(5)该克隆动物的培育过程涉及核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术，说明了高度分化
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