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紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量

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紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量

田 健,朱 凯*

【摘 要】摘要:目的 用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量。方法 采用超声提取法对人参进行提取,再采用水饱和正丁醇对人参提取溶液进行萃取,用紫外可见分光光度法测定其吸光度值。结果 测得的最大吸收波长为540 nm,人参皂苷Re在7.287~80.16 μg/mL范围内的线性关系良好。精密度RSD值为0.44%,平均回收率为104.33%。结论 用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量,简便易行,精确度高,测定速度快。 【期刊名称】吉林中医药 【年(卷),期】2016(036)008 【总页数】3

【关键词】紫外分光光度法;人参;总皂苷

人参为五加科植物人参Panax ginseng的干燥根。中国药典记载,人参性平,味甘、微苦。归脾、肺、心经。具有大补元气,复脉固脱,补脾益肺,生津,安神的功效。本实验采用紫外可见分光光度法对人参中的总皂苷进行含量测定。为人参资源进一步的开发和利用提供帮助。

1 仪器与试剂

标准品人参皂苷Re:购于中国药品生物制品检定所。TU-1810PC紫外可见分光光度计:北京瑞利分析仪器公司。BP211D电子分析天平:德国Sartorius公司。电动恒温水浴锅:江苏常熟医疗器械厂。实验室用纯水机sco80179:四川沃特尔科技发展有限公司。

2 方法与结果

2.1 溶剂的制备

2.1.1 对照品人参总皂苷Re溶液的制备 取人参皂苷Re5 mg,精密称定,置25 mL的容量瓶中,加入适量的甲醇使之溶解后,稀释并定容至刻线,摇匀,即得(0.200 7 mg/mL)。2.1.2 供试品溶液制备 精密称量人参药粉1 g,研细后(过60目筛),置25 mL量瓶中,加入适量的水溶液,超声使之溶解后,取出,放置阴凉处冷却,再加入蒸馏水定容至刻度,摇匀,用等量体积的水饱和正丁醇溶液进行萃取4次,回收正丁醇溶液后,干燥。取干燥后的供试品,加入适量的甲醇溶液溶解,并定容至50 mL容量瓶中。从续滤液中移取1 mL,置10 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻线,摇匀后备用。

2.2 最大吸收波长的选择 将对照品溶液、供试品溶液精密地吸取1、0.1 mL后,置于具塞试管中,低温挥去其中的溶剂,加入5%的香草醛-高氯酸溶液0.5 mL,立即摇匀。再置60 ℃的水浴加热15 min,放置冰水中立即冷却,加入77%的硫酸溶液5 mL,摇匀。以相应的试剂作为空白溶液。

将两者都在300~700 nm的波长范围内进行光谱扫描。实验结果显示,人参皂苷Re对照品和供试品都分别在540 nm处有最大的吸收峰,故选择波长540 nm为含量测定的波长。

2.3 线性关系的考察 精密量取人参皂苷Re对照品溶液(0.200 7 mg/mL)0.2、0.6、1、1.4、1.8、2.2 mL,加入5%的香草醛、高氯酸溶液0.5 mL,立即摇匀。再置60 ℃的水浴加热15 min,放置冰水中立即冷却,加入77%的硫酸溶液5 mL,摇匀。以相应的试剂作为空白溶液。在540 nm波长处测定吸光度。以对照品人参皂苷Re溶液的浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标。求得回归方程:Y=0.011 32X-0.002 9,r=0.999 9。人参

皂苷Re在7.287~80.16 μg/mL 范围内的线性关系十分良好。2.4 精密度实验 精密量取人参皂苷Re对照品溶液0.6 mL。将其置于具塞试管中,按照标准曲线项下方法测定其吸光度,并连续测定吸光度值6次,计算,考察精密度,精密度的RSD值为0.48%,符合标准。

2.5 稳定性实验 将对照品溶液人参皂苷Re、供试品溶液分别精密吸取0.6、0.2 mL,置于具塞试管中,按线性关系试验项下操作,测定30 min内吸光度的变化(每隔5 min测定1次)。实验结果表明,标品与样品的稳定性的RSD值为0.23%、0.27%,二者在30 min内稳定性较好,符合标准。 2.6 重现性实验 分别精密称取同一份样品,共6份。按2.1.2供试品溶液项下方法制备成供试品溶液,依法测定,计算样品中总皂苷含量。实验结果表明,样品的总皂苷平均含量为27.34 mg/g,其RSD值为0.29%,该方法重现性良好,符合规定。

2.7 加样回收率 取6份样品,精密量取过60目筛的样品0.5 g。在6份样品中分别按照1∶1的比例加入对照品人参皂苷Re,按2.1.2供试品溶液项下方法制备成供试品溶液,按照线性关系实验项下的操作,来测定其吸光度值,计算测得的总皂苷含量并计算其加样回收率。平均加样回收率为102.03%,其RSD为1.49%。由此表明此方法的准确性良好。

2.8 样品含量测定 取10批样品,按2.1.2供试品溶液项下方法制备成供试品溶液,每批样品处理两份,测定吸光度值,计算10批样品中总皂苷的含量。

3 讨论

为了保证实验的灵敏度,需将5%的香草醛-高氯酸溶液现用现配,并且注意避光

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