LightCycler480荧光定量PCR仪操作规程
1. 每次反应最后一步都必须做降温,降至40度,维持至少30秒。 2.在操作过程中,切忌戴有粉末的乳胶手套或裸手接触光学透性封板膜。 3.先开电脑和仪器,编辑程序后,再配制反应液。加样封膜完毕,在板式离心机中1500×g(3000rpm)离心两分钟,排除气泡。
4.先开电脑再开仪器,先关仪器再关电脑。打开电脑,并打开LightCycler480软件,然后打开LightCycler480仪器后方的电源开关,仪器与电脑软件接通后进行自检,仪器正面右边两盏桔黄色的灯会闪烁。自检完毕后,左边的灯会变绿,右边的灯仍为桔黄色。这时按一下灯右边带双箭头的开关,仪器的载板器会自动伸出,将准备好的反应板放入载板器中(反应板的切角在右下角)。再按一下带双箭头的开关,仪器的载板器会自动缩入仪器内,此时仪器能自动检测到反应板,原来呈桔黄色的灯会变绿,软件中Start Run按钮也同时变为激活状态。
5.设定完实验程序并编辑完样本后(样本信息可以在实验完成后编辑),点击软件中Start Run按钮,运行实验。
6.软件界面上出现Run Complete….标识时,说明实验运行完毕,按一下仪器上带双箭头的按钮,使载板器伸出,取下反应板,再按一下带双箭头的按钮,使载板器缩回,关闭LightCycler480仪器后方的电源开关,在电脑上分析实验数据。
7.分析完实验数据后保存结果,打印报告,并关闭电脑及总电源。实验员在离开PCR扩增区时带走用完的反应板。
维护SOP
LightCycler 480是一台免维护的仪器。
做任何维护工作前,须确认主机电源已被关闭。
预防性维护:
1.检查LightCycler 480主机两侧与背后空间,确保无任何阻碍空气流通的物品,包括书本、纸张或窗帘等;
2.若主机表面和桌面有灰尘,用不起毛的软布蘸少量清水擦拭干净。
清洁性维护:
若有需要,可用性质温和的商品化清洁剂或70%的乙醇溶液对LightCycler 480主机表面、热循环96孔模块和热盖进行清洁。 清洁96孔热循环模块:
1. 用移液器移取125μl 70%乙醇溶液或异丙醇至所有孔内; 2. 15分钟后,使用移液器对孔内溶液进行多次吹洗;
3. 移除孔内的液体,并使96孔模块孔内自然风干;注意操作时不要让清洗液腐蚀热循环模块的涂层。
LightCycler480 Software 1.5软件操作(中文版)
第一部分 基本界面及图标
概述:
一、 Overview界面
Exit:关闭LC480软件
Log off:从目前使用的数据库中退出并可登陆其他的数据库 Overview:点击该图标进入“Overview”界面
Navigator:点击该图标进入“Navigator”界面,可进行数据的导入导出等操作,
详见。。。。。。 Save:点击该图标进行保存 Export:导出当前打开的文件 Close: 关闭当前打开的文件 Print: 打印当前打开的窗口
Tools:打开“Tools”界面,可进行密码修改,建立和编辑用户,系统设置,查看
数据库状态、仪器状态、滤光片组合等操作 Help:查看软件版本,操作说明书等
二、New Experiment 界面
Run Module:编辑、运行或查看PCR程序及查看PCR实时数据
Subset Editor:点击该模块后可进行子集的编辑
Sample Editor:点击后进行样品信息的编辑
Analysis Module: 点击进行结果分析或查看已保存的分析结果
Report Module:选择需要的内容以报告的形式给出结果
Summary Module : 查看实验的总体概况,包括实验名称,所用的程序,检测模
式,滤光片组合等。概况的内容由系统自动生成
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