Wnt3a联合骨形态发生蛋白2对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响

Wnt3a联合骨形态发生蛋白2对骨髓间充质干细胞增殖及

成骨分化的影响

叶劲;赵利波;田志超;李亮宇;肖骏

【期刊名称】《中华实验外科杂志》 【年(卷),期】2011(028)010

【摘要】目的 观察经典Wnt/β-catenin以及骨形态发生蛋白(BMP)信号通路对大鼠骨髓来源的间充质干细胞(BMSCs)体外增殖以及向成骨方向分化的影响.方法 应用密度梯度离心联合贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞并分4组:对照组、Wnt组、BMP组、Wnt3a和BMP-2联合组,在不同时间点用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶(ALP)活性定量测定、Yon Kossa染色观察细胞向成骨分化和基质矿化程度.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨特异性标志物表达.结果 培养第7天,CCK-8测吸光度值联合组为0.845,Wnt组为0.738,明显高于对照组0.409(P＜0.05).培养第6天和第12天,ALP活性吸光度值联合组为63.8和144.3,BMP-2组为40.8和104.1,均明显高于对照组7.3和18.9(P ＜0.05).培养14 d后,联合组骨钙素mRNA表达量高于对照组,而Runx2及Osterix表达量与其他组比较增高不显著.培养3周后,Yon Kossa染色显示联合组钙结节数量及大小均高于对照组.结论 Wnt3a因子和骨形态发生蛋白-2联合诱导能有效地促进骨髓间充质干细胞增殖及向成骨方向分化.%Objective To observe the impact of classical Wnt/β-catenin and bone morphogenetic protein (BMP) signaling pathway on rat bone marrow-derived mesenchymal stem cell (BMSCs) proliferation and osteogenic differentiation.Methods Bone marrow mesenchymal stem