基因工程及其应用
主讲:黄冈中学生物高级教师 童金元
一、基因工程的原理
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性状。 原理:基因重组。 操作水平:DNA分子水平。 操作环境:生物体外。
结果:定向地改造生物的性状,获得人类所需要的产品(品种)。 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶(限制酶)
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。
例如:大肠杆菌()的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 2、基因的针线——DNA连接酶
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,这样一个重组的DNA分子才能形成。
3、基因的运输工具——运载体
要让一个从甲生物细胞内取出来的基因(如抗虫基因),送入受体细胞(如棉细胞),还需要有运输工具,这就是运载体。 常用的运载体:质粒、噬菌体和动植物病毒。 大肠杆菌的质粒:
最常用的质粒是大肠杆菌的质粒,其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用,但复制只能在宿主细胞内进行。
4、基因工程基本步骤 (1)获取目的基因
基因工程的第一步,是取得人们所需要的特定基因,也就是目的基因如抗虫基因,抗病基因、种子的贮存蛋白基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等都是目的基因。
(2)目的基因与运载体结合
用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因
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