菊花的组织培养
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1．说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。
2．说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 3．学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。 4．学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 课题重点：
1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2．选取适宜的培养材料和培养基。 课题难点：
1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2．选取适宜的培养材料和培养基。 自主探究 知识点 植物组织培养的基本过程 观察与思考 1、什么是细胞分化？ 2、植物组织培养技术运用了什么样的原理？ 3、什么是愈伤组织？ 6、观察参考书P32页，总结植物组织培养的基本过程 归纳与总结 1、植物个体发育过程中，细胞在 上产生 的过程，称为细胞分化。 2、植物组织培养的原理是： 。 3、愈伤组织是指离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，通过 形成的 、 4、由高度分化的植物组织或细胞产生 的 5、脱分化产生的 继续进行培养，又可以重新 成根或芽等器官，这个过程叫做 6、 离体的植物组织或细胞———→ ——→根、茎、叶 用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做 注意：在植物组织培养过程中，往往需要植物激素，人为的控制细胞的脱分化与再分化。 影响植物组织培养的因素 1、不同植物组织的培养，培养难易程度如何?同一植物组织的不同部分培
4、什么是脱分化？ 的薄壁细胞。 5、什么是再分化？ 过程，叫做脱分化，或者叫做去分化。 1、不同植物组织或同一植物的不同部分，培养的难易程度 ，菊花的组织培养，一般选择 的茎上部新萌生的侧枝。 1
养呢？举例说明 试总结一般的培养基的成分都有哪些？ 比较对两类激素的不同的操作顺序和用量，其实验结果有何不同？ 4、除了上述因素外，对于其他条件有何特殊要求？ 实验操作 实验操作过程 求相对特殊，需要适宜的培养基。常用的一种培养基是MS培养基。其中，大量元素有 等；微量元素有 等；有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、以及蔗糖等。 另外还要添加 ________。当先使用生长素，后使用细胞分裂素时，实验结果：_______________________________；当先使用细胞分裂素，后使用生长素时，实验结果_____________________；同时使用细胞分裂素、生长素时，实验结果： _。生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，则有利于 _____________________；比值低时，则有___________；比值适中时，则促进_______________。 一般PH控制在 ；温度控制在 ；每天用日光灯照射12小时。 一、制备MS固体培养基 实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备 1、配制各种母液。 配制母液时，大量元素浓缩 ，微量元素浓缩 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。 2、配制培养基。 配制1LMS培养基时，先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g,去配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。调节pH值，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装50或100mL 3、灭菌。高压蒸汽灭菌 二、外植体消毒 选取菊花茎段时，要取 。 无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料（外植体）的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑_______________；另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。一般情况下，细菌污染可能是由接种2、通过阅读P33，2、离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要3、对照P33页表，启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素是 2
人员造成的，真菌污染可能是_________灭菌不当。 三、接种 接种前，用体积分数70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼烧灭菌 四、培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒，温度控制在18-22℃，并且每天用日光灯光照12h 五、移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中 六、栽培 每天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 思考： 1、实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌，实验中是如何做到无菌操作的？ 2、与微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些不同？ 例1 (高考江苏卷)要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，需要( ) A．具有完整细胞核的细胞 B．离体状态
C．导入外源基因 D．一定的营养物质和激素
解析：将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株利用了植物细胞的全能性。植物细胞(具有完整细胞核的细胞)只有在离体和一定营养物质及激素等的共同作用下，经细胞分裂形成愈伤组织，然后由愈伤组织再分化形成幼苗等才能表现出全能性。 答案：A、B、D
例2 （高考广东、广西卷）下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是（） A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜 D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性
解析：在植物组织培养过程中，细胞首先脱分化形成愈伤组织，然后重新分化形成根或芽等器官，愈伤组织的细胞特点是细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，组织培养的理论基础是细胞全能性。 答案：A、D
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