分子生物学 期末考试复习题

C、某些转录因子的存在 D、mRNA含有的内含子的数目

22、已知双链DNA的结构基因中，信息链的部分序列是5'AGGCTGACC3'，其编码的RNA相应序列是 ( D )

A. 5'AGGCTGACC3' B. 5'UCCGACUGG3' C. 5'AGGCUGACC3' D. 5'GGUCAGCCU3' E. 5'CCAGUCGGA3' 23、以下关于RNAi的叙述中，错误的是（ D ）

A、可特异性地导致mRNA的降解 B、可特异性地抑制mRNA的翻译C、只存在于真核生物 D、通常抑制特定mRNA的转录

24、一种典型的限制性酶切割DNA，切点切开后的结构是（ C ） A、上面一条链是5’-○P，下面一条链是3’-○P B、上面一条链是3’-○P，下面一条链是5’-○P C、两条链都是5’-○P D、两条链都是3’-○P 25、PCR实验不需要的成分是（ A ）

A、RNA引物 B、DNA模板C、dNTP D、变性和复性循环

26、以下用来确定人肝细胞所有的基因的表达水平的技术手段是（ C ） A、Northern印迹 B、Western印迹 C、基因芯片 D、噬菌体展示 6、下列最可能是限制性酶识别位点的碱基序列是（ B ） A、AGTC B、ACGT C、ATCG D、AACC

27、在大肠杆菌中用于表达外源基因的载体在启动子下游通常含有SD序列，这个序列的作用是（ A ）

A、为核糖体提供识别位点 B、提供转录位点 C、增强启动子活性 D、提高RNA稳定性 28、原核和真核生物共有的转录调控序列是 ( B )

A. poly (A) 信号 B. 启动子 C. 操纵子 D. 终止子 E. 增强子 29. 上游启动子元件是 （ A ）

A. 一段核酸序列 B. TATA盒的组成部分 C. 位于转录起始点下游 D. 不一定被转录 E. 转录后可以被剪接加工 30. 关于开放读框叙述正确的是 ( A )

A. 是mRNA的组成部分 B. 内部有间隔序列 C. 真核生物的开放读框往往串联在一起

D. 内部靠近5' 端含有翻译起始调控序列 E. 由三联体反密码子连续排列而成

31. 哪种情况会导致移码突变 ( C )

A. 倒位 B. 颠换 C. 插入一个碱基 D. 连续缺失三个碱基 E. 以上都不对 三、填空

1、1．在DNA合成中负责复制和修复的酶是 DNA 聚合酶Ⅲ 。 2．染色体中参与复制的活性区呈Y开结构，称为 复制叉 。

3．在DNA复制和修复过程中，修补DNA螺旋上缺口的酶称为 DNA聚合酶Ⅰ 在DNA复制过程中，连续合成的子链称为前导链 ，另一条非连续合成的子链称为 后滞链 。

4 在 DNA修复过程中，需要第二种酶， DNA 连接酶 ，作用是将 DNA中相邻的碱基 连接 起来。 原核生物 DNA聚合酶具有外切核

酸酶的活性。有两种外切核酸酶的活性，它们分别从 5‘-3’ 和 3‘-5’降解 DNA。DNA聚合酶 Ⅱ 只有 3‘-5’ 外切核酸酶活性。 5．如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3′端，一个含3′→5′活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为 校正核酸外切酶 酶。

6．DNA后随链合成的起始要一段短的 RNA引物 ，它是由 DNA引发酶 以核糖核苷酸为底物合成的。

四 简答

切除修复：通过切除－修复内切酶使DNA损伤消除的修复方法。一般是切去损伤区，然后在DNA聚合酶的作用下以露出的单链为模板合成新的互补链，最后用连接酶将缺口连接起来。

sos修复：SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复，使细胞有较高的突变率 同源重组：同源重组是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组反应通常根据交叉分子或Holliday结构的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holliday 结构的拆分。

位点特异性重组：DNA节段的相对位置发生了移动，从而得到不同的结果─DNA序列发生重排。位点特异性重组不依赖于DNA顺序的同源性（虽然亦可有很短的同源序列），而依赖于能与某些酶相结合的DNA序列的存在。

逆转录酶：以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。 选择性剪接：（也叫可变剪接）是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式。选择不同的剪接位点组合产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者，在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。

RNA 编辑：在mRNA水平上改变遗传信息的过程。具体说来，指基因转录产生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。

开放阅读框：是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。 SD 序列：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。

分子伴侣：细胞核内能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素。广泛存在于原核生物和真核生物的一类保守蛋白，分布于细胞的各个区域。

衰减子：是位于细菌操纵子上游的一段核苷酸序列。原核生物中通过翻译前导肽而实现控制DNA的转录的调控方式称衰减作用。

RNA 干扰：在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

增色效应：由于DNA变性引起的光吸收增加，也就是变性后DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。

减色效应：若变性DNA复性形成双螺旋结构后，其260nm紫外吸收会降低,这种现象叫减色效应

限制性核酸内切酶：是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。

启动子：是基因（gene）的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度。

终止子：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列

Southern 杂交、Northern杂交、FISH 、Western杂交区别

Southern 杂交(637)：利用标记的核酸做探针，与转化细胞的DNA进行杂交，直接筛选和鉴定目的序列克隆

Northern杂交（637）：利用标记的核酸做探针，与转化细胞的RNA进行杂交，直接筛选和鉴定目的序列克隆

FISH：荧光标记的原位杂交技术，一种用能和染色体特定序列高度特异性结合的荧光标记的探针来鉴定和定位染色体上特定DNA序列的存在或缺失

Western杂交： 利用标记的抗体和特定目标蛋白结合以检测组织匀浆样本或提取物样本中特定蛋的一种技术 蛋白质糖基化类型与功能 一,类型：N-糖基化,O-糖基化 二，功能：（火把一定分解）

1.活性必需 介导某些蛋白质的生物活性起直接作用（HCG） 2.靶向转运 帮助目的蛋白到达其功能场所(溶酶体酶转运）

3.分子识别 直接参与配体-受体识别，底物-酶结合（某些细胞因子受体与细胞因子的识别）

4.结构稳定 寡糖有助于稳定蛋白质构象，保护其免受蛋白酶攻击，延长寿命。 5.易于溶解 增强蛋白质的水溶性

6.定向嵌膜 避免膜蛋白在转运和发挥作用时翻转

蛋白质泛素化的生理意义：在蛋白质的定位、代谢、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用.参与细胞周期、增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控.通过泛素化的修饰能使一些生命过程中起决定作用的酶特定识别要作用的蛋白质以发生作用,意义重大.

原核基因表达在翻译水平上的调控机制:（SM饭饭盒饭） 1、SD序列（核糖体结合位点）的影响 2、mRNA的稳定性 3、翻译阻遏 4、反义RNA 5、核糖开关 6、翻译移码

真核细胞翻译水平的调控方式有哪些：（是M小框林干）

(1)对翻译起始的调控，包括阻遏蛋白的调控、翻译起始因子(IF)的功能调控、

起始密码子及上游5’-UTR和下游3’-UTR对翻译的调控； (2)mRNA稳定性与翻译控制； (3)小分子RNA对翻译的影响。 (4)上游开放阅读框

(5)翻译起始因子，核糖体蛋白磷酸化 (6)RNA干扰

五 综述就本学期自己所学知识,谈谈分子生物学在中医中药研究中的应用 分子生物学是从分子水平来研究生命现象的一门基础学科.把分子生物学的新技术引入到中医药研究中 ,不仅为阐释中医药理论、加深对疾病本质的认识、探讨中药的作用机理和研制新药提供了一种新的研究工具和手段 ,而且还将启迪新的思想和发展新的诊疗技术 ,并将对中医药学的变革和进步起到巨大的推动作用.

Sextama盒：原核生物启动子上-35bp处的TTGACA区，又称-35区。RNA聚合酶转录起始的识别序列。

Probnow盒：原核生物中，在启动子上游有一个由5-6个核苷酸组成的共有序列位于起点上游10bp处，所以又称—10序列，是转录的解旋功能部位，具有高度保守性和一致性。

TATA盒：是构成真核生物启动子的元件之一。其一致顺序为TATAATAAT（非模板链序列）。它约在多数真核生物基因转录起始点上游约-30bp（-25~-32bp）处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。

共翻译转运：内质网膜上的膜结合核糖体在合成蛋白质时，由于蛋白质N端的信号序列的作用，使得在多肽链合成完成之前就在进行转运。

翻译后转运：合成的蛋白质穿过生物膜的转移。游离核糖体上合成的蛋白质必须等蛋白质完全合成并释放到胞质溶胶后才能被转运,所以将这种转运方式称为翻译后转运。

顺式作用原件：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。：

反式作用因子：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。多为转录因子

正调控：当阻遏蛋白从操纵基因上脱离后，激活蛋白与启动子结合以及和RNA聚合酶的相互作用，帮助结构基因的转录起始，促进相应蛋白的合成。

负调控：是指 阻遏蛋白与操纵基因的结合，阻止了RNA聚合酶对操纵子结构基因的转录。

锌指结构：一种常出现在DNA结合蛋白中的一种结构基元。是由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn2+构成，形成的结构像手指状。

亮氨酸拉链：出现在DNA结合蛋白质和其它蛋白质中的一种结构基元，即模体。当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的α-螺旋的疏水面相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链。

原位PCR：在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较

大潜力的新技术。

多重PCR：又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同·。

PCR—RFLP：RFLP是指基因型之间限制性片段长度的差异，这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。

PCR-SSCP：指单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。

定量PCR：是指用外标法（荧光杂交探针保证特异性）通过监测PCR过程（监测扩增效率）达到精确定量起始模板数的目的，同时以内对照有效排除假阴性结果（扩增效率为零）。

逆转录PCR：是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。 真核细胞染色质水平调控的方式有哪些 6 1.染色质活化 2.染色质缺失 3.基因扩增 4.基因重排 5.基因组印记

6.组蛋白修饰和DNA的甲基化

简述基因诊断常用的方法技术（和PD鸡心）

①核酸杂交 是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。 ②PCR技术 扩增微量核酸，用于检测已知序列或已知部分序列的基因，简便快捷，成本低廉。

③DNA测序 目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。

④基因芯片技术 基因芯片技术是近年来发展十分迅速的大规模、高通量分子检测技术。其基本原理是核酸杂交，其基本过程是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针，有规律的排列固定于支持物上，形成矩阵点。

PCR原理

该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端，并以此为起始点，沿模板5′→3′方向延伸，合成一条新的DNA互补链。