大潜力的新技术。
多重PCR:又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同·。
PCR—RFLP:RFLP是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。
PCR-SSCP:指单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。
定量PCR:是指用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果(扩增效率为零)。
逆转录PCR:是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。 真核细胞染色质水平调控的方式有哪些 6 1.染色质活化 2.染色质缺失 3.基因扩增 4.基因重排 5.基因组印记
6.组蛋白修饰和DNA的甲基化
简述基因诊断常用的方法技术(和PD鸡心)
①核酸杂交 是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。 ②PCR技术 扩增微量核酸,用于检测已知序列或已知部分序列的基因,简便快捷,成本低廉。
③DNA测序 目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。
④基因芯片技术 基因芯片技术是近年来发展十分迅速的大规模、高通量分子检测技术。其基本原理是核酸杂交,其基本过程是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律的排列固定于支持物上,形成矩阵点。
PCR原理
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端,并以此为起始点,沿模板5′→3′方向延伸,合成一条新的DNA互补链。
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