? 商业性试剂盒检测肽的混合物；就检测NT-proBNP而言，很可能至少检测到NT-proBNP1-76和NT-proBNP1-108的混合物。
? BNP通过多种机制被清除，包括受体清除，中性内切酶降解和由多种器官被动清除。
有多种器官可能以被动方式清除NT-proBNP。
? 机制研究显示肾脏对NT-proBNP和BNP的清除能力相等
表1B型利钠肽（BNP）基因的重要调节因子*
刺激物 β肾上腺素能激动剂 潜在效应器 cis元素 cAMP, Src, Rac, GSK3β, GATA (-85), MCAT (-97 和 CaMKⅡ, PI3K -124) 白介素-1β Ras, Rac, p38 MAPK, PKC MCAT (-97) 内皮素-1 Rac, Src GATA; -1818至-408之间区 域; TRE 在 -1000 应激 MKK6 and p38 MAPK激动剂 类AP-1位点在 -111 缺血损伤 未知 -408至+100之间区域 苯肾上腺素 神经钙蛋白 NF-AT 在 -927 甲状腺素（T3） 甲状腺受体 TRE 在 -1000 机械拉伸 p38 MAPK SSREs (-652至-633和-162) AP-1＝活化蛋白-1；cAMP＝环磷腺苷；CaMKⅡ＝钙/钙调节蛋白依赖蛋白激酶-Ⅱ；GSK3β＝糖原合成酶激酶-3β；MAPK＝丝裂原激活蛋白激酶；MCAT＝肌-CAT结合点；MKK6＝丝裂原激活蛋白激酶激酶6；NF-AT＝活化T细胞的核因子；PI3K＝磷脂酰肌醇3-激酶；PKC＝蛋白激酶C；SSREs＝剪切压力反应元素；TRE＝TPA-反应元素。
*大量不同的能对BNP基因活性产生巨大影响的因素反映在了临床上各种不同的疾病状态之中，从而影响了患者BNP和NT-proBNP的浓度。
图1利钠肽合成与释放范例。BNP＝B型利钠肽；DPP-IV＝二肽基肽酶-IV；NT-proBNP＝氨基末端B型利钠肽前体。
氨基末端B型利钠肽前体：化验分析的考虑因素
Jordi Ordonez-Llanos, MD, PhD,a Paul O. Collinson, MD,b
and Robert H. Christenson, PhDc,*
――――――――――――――――――――――――――――――――――――――― 氨基末端B型利钠肽前体（NT-proBNP）是一种在实验室中能方便处理的分子，在分析前与分析时拥有优势，比如在不同温度下都相当稳定，血样本要求不严，且在所有商用NT-proBNP检验方法中其结果都高度一致（包括最近发表的床边诊断结果）。NT-proBNP 在检测方面的另一个主要优点是其高度的分析精确率。NT-proBNP检测的参考值受到检测人群的影响。在健康人群中，检测值较低，而在患病人群中如急性呼吸困难患者，依照更高的参考值则更有价值。在评估NT-proBNP值变化的显著性时，还应考虑其生物学变异。在分析稳定型心衰患者时，其生物学变异为25％－40％。本文从临床实验的角度综述了NT-proBNP在实验室检验方面的内容。? 2008 Elsevier Inc. All rights reserved. (Am J Cardiol 2008;101[suppl]:9A–15A)
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――――
利钠肽（NP）检测是在心血管医学中十分有价值的诊断和预后判断工具。因此，临床1和化验2指南都已发表，而且越来越多的实验室被要求进行B型利钠肽（BNP）和氨基末端B型利钠肽前体（NT-proBNP）的检测。对这些标记物的检测方法越来越多，实验医学专家也正面对着越来越多种选择。在此情况下挑战确实存在。在血液中利钠肽及其前体和产物由多种化学分子组成，而现在尚没有一个受到认可的检测方法能检测它们。于是，临床实验室的主要研究目标就是能够得到不受方法学和使用仪器影响的独立的结果，且此结果在各实验室间具有可比性。另外，由于BNP与NT-proBNP检测方法和仪器的日新月异，临床实验室诊断工作人员必须提供分析前，分析中和分析后的所有信息，以利于临床医生应用这些方法。本文的目的是综述影响NT-proBNP检测的一些最重要因素和在适当的时候比较NT-proBNP与BNP的特质。
检验前因素
控制生物检验中一切可能引起分析前变异的因素至关重要，因为68％的实验室错误发生在分析前阶段，3而分析前的不精确度被假设为0（或接近0）。
因此，了解BNP和NT-proBNP在分析前期可能有的影响因素也很重要。将分析前变异降至最低是选择一个检验方法的重要考量。——那些在BNP检测中经常存在的分析前影响因素在NT-proBNP几乎没有。
NT-proBNP的检测可以在各种不同的标本中进行，血清和肝素化血浆中得到的结果可互用，它们也是检测NT-proBNP时推荐的标本。在乙二胺四乙酸（EDTA）化血浆中测得的NT-proBNP较在血清或肝素化血浆中低（根据方法的不同可能低10%-13%）。而在血中存在NT-proBNP碎片且其在血清中比在乙二胺四乙酸化（EDTA）血浆中存在更多。4基于此，若在体外有NT-proBNP存在的标本则需建议使用EDTA（或抗蛋白酶制剂，如抑肽酶）。然而，直到此类体外标本被阐述清晰且能明确证实此类碎片与检测有关及其临床应用之前，血清和肝素化血浆依旧是NT-proBNP检测的选用标本。枸橼酸盐化血浆和草酸盐化血浆不建议用于NT-proBNP的分析。肝素化全血可以用于即时检测系统，此种NT-proBNP检测方法在最近被报道使用。5,6
BNP检测需用EDTA作抗凝剂，且标本不能被存放在非硅化玻璃管内因为血液中激肽释放酶与玻璃接触后被活化迅速降解BNP。而用于NT-proBNP分析的血样都可以抽进玻璃或塑料管中而不会改变其稳定性。
为了将分析前影响降至最低，对于检测个体在检测BNP和NT-proBNP抽血前或抽血时应有的状态则尚未明确。然而无论在健康人或心衰（HF）患者中，检测前的非规律运动对分析前所产生的影响仍然知之甚少。我们所知的是心衰患者做最快心率50％的运动时其BNP和
NT-proBNP浓度会较运动前升高；在参考人群中做相同或更大负荷的运动后没有发现类似的升高。7有一个不同点是在经过耐力训练的个体中进行激烈运动后；大多数此类个体的结果值都较参考人群运动后的参考值高，8虽然取自休息或非激烈运动时不同血样参考值的变异情况也未能始终如一地被报道。
姿势对于NT-proBNP值并没有太大的影响。在坐，立或行走后得到的血样与平卧时相比差
9
异<7%。同样地，对于住院或门诊患者抽样姿势都没有显著的影响。然而，当患者抽样前没有
10
休息或站立和行走了30分钟后其BNP水平会上升15 ％ 。因此，最好建议个人在抽样检测NT-proBNP前躺床上或坐≥10-15分钟。至于针对其他许多生化变异而言，止血带的使用时间应尽可能短。
并没有发现NT-proBNP有持续的昼夜节律变化，这与其他神经内分泌激素和共同代谢物不9,11
同，虽然一天的浓度变化约有20％ 。在心衰患者中有报道发现BNP的一个较小但重要的昼
11
夜节律变化。
关于存储对NT-proBNP的影响，在不同的储存条件下血清或血浆NT-proBNP的浓度都较稳
9,12
定，如室温下保存7天，4 ℃保存10天 ，-20 ℃或更低温度下保存若干个月；5次冻融循
9,13
环不会显著改变NT-proBNP的浓度。在室温条件下的稳定性有利于在通常较繁忙的临床实验室处理NT-proBNP标本；在这方面，NT-proBNP是一种较BNP更方便处理的分子，BNP的稳
14
定性依赖于具体的试剂盒。此外，BNP在室温条件下甚至在冷冻情况下都不稳定（表1）。14,15
BNP和NT-proBNP可在尿中检测到，且尿液检测已被认可可以作为一种替代血清或血浆检测的方便方法，主要应用于在人群筛检项目中检测BNP。血浆和尿液中BNP浓度的相关性在左心室收缩功能不全（ LVSD ）个体中较弱，在无LVSD个体中也不显著。然而，在社区筛查
16
中， 尿液NT-proBNP检测发现LVSD的灵敏度比血浆检测高。然而，在对这些结果进行解释时应特别谨慎，因为在使用本为血清/血浆设计的试剂盒检测尿液时可能因低蛋白含量的标本缘故而产生基质效应。
检测因素
目前市场上的几种NT-proBNP检测皆为全自动。在一些多中心研究中自动化检测方法的总体不精确率<6.5 ％ ，且当研究在同一实验室进行时该值更低。这些值符合由心脏损伤标志物标准委员会（国际临床化学联盟）关于利钠肽检测所推荐的不精确率标准（即在参考区间内不精确值<15 ％，用于监测标志物趋势时该值需在10 ％以下）。
鉴于利钠肽的高生物变异性，其他推荐的分析不精确率的标准（如，生物学变异半量）基本为现有的各种方法所接受。任何生物学检测的一个关注重点是该检测方法在非患病人群检测值范围内的不精确率（如，截点所在的值域范围）。不精确性性质的研究表明，应用不同器材和方法时，低至10 -20ng/L的值可以在总分析不精确率<15％的情况下检测得，而截点范围的
12,18
不精确率则更低。因此，NT－proBNP适合于心力衰竭筛查的检测值的分析不精确率符合这些规范。此外，由于检测方法的线性规律，最高至35，000ng/L的样本在检测前不需稀释。 在血液中通过现在的检测发现的是各种不同BNP分子中的哪种分子是实验室专业人员和临床医生都十分感兴趣的事物。对于哪些利钠肽形式在循环中起生理作用的理解尚处于萌芽期。利用质量分光光度技术分析表明，在严重心衰患者中可能缺乏成熟BNP1-32，但商业性BNP检测中仍
1920
然在这些个体中发现BNP1-32 的存在，在血液中还发现了BNP（BNP3-32）的蛋白质水解形式。由于proBNP1-108氨基末端区域包含的序列允许低聚反应，有一个NT-proBNP的三聚体形式被描
214
述。如前所述，NT-proBNP分解的发生是因为蛋白质水解在分子的羧基和氨基末端都能发生。因此，一些比NT-proBNP1－76大和小的分子都在血液中存在; 低聚和分解都可能会暴露或
22
隐藏可由检测中应用的抗体识别的抗原表位。最后，完整的proBNP1-108也在血液中发现。重要的是这些代谢问题不会减少通过现有的检测而建立起来的在BNP与NT-proBNP之间的检测，诊断和结果的联系。
相关推荐：
loading