DNA的粗提取与鉴定一轮学案

酶具有相似作用的物质是（ ）

A．NaCl溶液 B．蒸馏水 C．柠檬酸钠 D．冷却的酒精 8．DNA不溶于下列何种溶液（ ）

A．NaCl溶液 B．KCl溶液 C．MgCl溶液 D．酒精溶液 9．下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是（ ） A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 B．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动

C．在析出DNA粘稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多 D．在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却 E．在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌 10．在“动物DNA的粗提取与鉴定实验”中： （1）实验中两次使用蒸馏水，第一次目的是 ， 第二次目的是 。 （2）说明不同浓度的NaCl溶液的作用：

2mol/L NaCl的作用 ； 0.14mol/L NaCl的作用 ； 0.015 mol/L NaCl的作用 ；

（3）提纯DNA的原理是 ，所用试剂为 。 搅拌要 ，目的 。

（4）能否用哺乳动物血液代替？简述理由。 。 此实验中有几次用玻璃棒搅拌，每次搅拌的方向是一致的；但每次搅拌的强度不同，请就此予以说明。

（1）提取鸡血细胞核内物质时，应 搅拌，目的是 。 （2）向含核物质的2mol/L NaCl 溶液滴加蒸馏水析出DNA粘稠物时，应 搅拌，目的是 。

（3）DNA粘稠物再溶解于2mol/L NaCl 溶液时，应 搅拌，目的是 。 （4）用95%的冷却酒精提取含杂质较少的DNA时，应 搅拌，目的是 。 11．以下是有关DNA的粗提取实验的阅读材料：

a．核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶（水解DNA的酶）的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。 b．核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白（由核酸和蛋白质组成）的形式存在，DNA核蛋白在1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很大，但在0.14mol/L NaCl 溶液中溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0.14mol/L NaCl 溶液。

c．用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入2．5倍体积，浓度为95%的酒精，可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠，可用玻璃棒搅成团取出。 d．DNA在强酸性环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。

e．实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol/L NaCl 溶液、1 mol/L NaCl 溶液、苯酚、95%的酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量

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筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。

以下是DNA粗提取实验的步骤，请根据以上阅读材料回答有关问题： （1）研磨：取10克花椰菜加适量的 、 和石英砂，研磨成匀浆。 （2）过滤。 （3）将滤液稀释6倍，其目的是： 。 （4）离心处理，产生沉淀。

（5）取沉淀物，臵于2毫升1 mol/L NaCl 溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2毫升苯酚充分震荡后静止，待其分层后弃其上层苯酚。这一步的目的是除去 。 （6）如何将剩余溶液中的DNA提取出来？ 。 （7）如何证明提取物质确实是DNA分子？ 。

其实验过程的要点是向放有DNA的试管中加入适量该试剂，混合均匀后，将试管臵于 中5min，待试管 后，观察试管中的颜色变化。这个实验也说明DNA耐 温，前次温度有利于 ，后次温度则有利于DNA 。 12．“DNA的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。

组别 A B C D E 实验材料 鸡血 菜花 人血浆 人血细胞 鸡血 提取核物质时 加入的溶液 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 2mol／L的氯化钠 蒸馏水 去除杂质时 加入的溶液 95％的酒精(25C) 95％的酒精(冷却) 95％的酒精(冷却) 0．14mol／L的氯化钠 95％的酒精(冷却) DNA鉴定时 加入的试剂 二苯胺 双缩脲 ， 二苯胺 双缩脲 二苯胺 (1)实验材料选择错误的组别是 。其原因是 。

(2)实验步骤(不包括实验材料)均正确，但得不到DNA的组别是 。

(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是 ；蓝色较淡的是 ，其原因是 。

(4)B组实验不成功的最主要原因是 。

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1-9 ABC ABC ADDDB

10.（1）使血细胞吸水破裂，溶解细胞核内的DNA；降低NaCl溶液的浓度，降低DNA分子在NaCl溶液中的溶解度析出DNA分子（2）溶解含DNA的核物质；使含DNA的丝状粘稠物析出DNA分子；进行DNA鉴定（3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些盐类蛋白质可溶于酒精溶液；95%的冷却酒精；轻缓、同方向；保持DNA分子的完整性（4）不能，成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核

（1）快速；加速血细胞破裂（2）轻缓；尽量保持DNA分子的完整性（3）轻缓；尽量保持DNA分子的完整性（4）轻缓；保持DNA分子的完整性

11. （1）柠檬酸钠溶液、1 mol/L NaCl 溶液（3）使DNA核蛋白溶解度降低而析出（5）（DNA核蛋白中的）蛋白质（6）向下层溶液中加2．5倍体积，浓度为95%的酒精，此时用玻璃棒搅动，玻璃棒上成团的物质即是DNA（7）用适量浓硫酸处理提取物，再滴加二苯胺酸性溶液数滴，如有蓝色物质出现即可证明提取物为DNA。沸水浴；冷却；高；加快染色反应的速度；析出。

12. (1)C、D 人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞中没有细胞核，选用这些材料得不到DNA或得到的DNA很少 (2)C (3)A、E A 冷却的酒精对DNA的凝集效果较佳，该组使用的是25℃的酒精 (4)菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到DNA(应采用研磨的方法)

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