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二、SD大鼠日常饲养管理 1、进入屏障及准备工作 进入屏障的消毒
(1)进入外更衣室,关闭外侧门。
(2)脱下的衣服、眼镜、手表、戒指等放在更衣箱内,进入淋浴室。
(3)38—40℃温水淋浴,用药皂、香波、护发素洗净手足、身体及头发,然后用水漱,最后洗净全身。
(4)进入内更衣室后,先用外科洗手液将双手反复搓洗消毒30s后才能接触内更衣室的无菌物品。
(4)先用灭菌后的毛巾擦干身体、头发后,再依次穿上隔离服(动物饲育区域专用),戴上手套,戴眼镜的一般在饲育区内有专用眼镜,最后整理好衣服。
(6)打开内更衣室门,迅速进入风淋间进行风淋。 (7)进入SPF区域。 准备工作
(1)计划好当天的工作内容,在洁库配好消毒液,取足当天工作所需的物品,一次移入动物房,遵循人员物品单向流动的原则。 (2)进入动物房确认饲育室有无异常。包括室内温度、湿度、水瓶有无漏水、有无动物逃逸、室内有无其他异常等。
(3)检查每盒动物的饮水及摄食状况,若饮水及摄食正常则继续一天的工作。
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(4)若饮水及摄食不正常的动物笼,先检查是否饮水瓶阻塞,再观察动物是否有疾病征兆。若有,立即上报。
(5)发现动物死亡,要调查死亡原因,判断事故死亡还是异常死亡,并报告,不能确定原因的要将整盒动物送出屏障待查。 2、饲养环境
屏障环境饲养的SD大鼠经过人们无数代的定向选择,生活习性有了一定的改变,对环境的适应性差,不耐冷热,要求生活在清洁无尘、空气新鲜的环境下。
SD大鼠喜阴暗、安静的环境,对环境温度、湿度很敏感,经不起温度的骤变和过高的温度。夏季温度过高常影响种母鼠的受胎率和仔鼠生长发育。冬季室温过低,不仅会影响种鼠的生长繁殖,且易发生多种疾病。饲养环境控制应达到如下要求:温度在18~26℃,相对湿度40~70%,一般大鼠饲养盒内温度比环境高1~2℃,湿度高5~10%。噪音85分贝以下,氨浓度20PPm以下.通风换气8~12次/小时。
SD大鼠怕强光,在比较强烈光照下,哺乳母鼠易发生神经紊乱,可能发生吃仔鼠的现象。受到噪音的刺激,也会吃仔鼠。 3、饲喂
SD大鼠为随时采食、多餐习性的动物。大鼠采食量一般为5g(100g体重24小时)。在鼠盒的料斗内应经常有足够量的新鲜干燥饲料,对于群养盒,每周应固定两天添加饲料,其它时间可根据情况随时注意添加。
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★ 注意事项
(1)操作:①灭菌饲料使用料铲给食,不能直接用手拿取。②饲料用料斗给食,落在地上的不能使用。
(2)给食量:饲料不宜给得过多,过多易受微生物污染,最好2次给食之间不出现剩余。
根据SD大鼠不同阶段的生长发育特点,应有不同的给饲标准。由于种鼠群和生产鼠群交配繁殖频繁,尤其生产种母鼠的负担重,能量消耗大,因此除供给足够的块料外,还要定时饲喂少量葵花籽。 4、给水
大鼠饮用水为PH2.5~2.8的酸化水,用饮水瓶给水,每周换水2~3次,大鼠饮水量一般为8~11ml(100g体重24小时),要保证饮水的连续不断,拧紧瓶塞,防止瓶塞漏水造成动物患病、溺死。一般日常饲养应先加水瓶再加饲料以便加饲料时检查有无水瓶漏水,完成当日工作离开饲养室前应再次检查水瓶和饲料。还应常检查大鼠在吸水过程中,口内食物颗粒和唾液可倒流入水瓶。为避免微生物污染水瓶,水瓶灭菌后仅限一次性使用。严禁未经消毒的水瓶继续使用。
实验动物饮用水处理器应当定期清洗维护。定期对滤芯和管路进行清洗或更换。 5、换窝
换窝每周进行1—2次,换窝前要用事先配好消毒液,擦拭操作台,浸泡器械。将清洁鼠盒成摞置于地面,取下待换鼠盒放置在操作台上,打开鼠盒盖放在清洁鼠盒上,用手提起大鼠尾部放入清洁鼠盒,
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盖上鼠盒盖,用蘸有消毒液的抹布擦拭摆放鼠盒的饲养架,将鼠盒放回原处,一个饲养盒内动物的更换后,应把手浸在消毒液中消毒后再继续换窝。 ★ 注意事项
(1)大鼠牙齿尖锐,换窝时要防止被咬伤。
(2)手提大鼠尾部时不要抓尾巴末端,以防大鼠挣扎造成尾部皮肤脱落。
(3)换窝时如遇母鼠正在哺乳应先将母鼠取出,再动仔鼠,以防被母鼠咬伤。
(4)换窝时如遇母鼠正在产仔应推迟换窝,以免惊扰母鼠造成吃仔。
换窝过程中应注意大鼠的繁殖情况如有新生仔鼠应及时记录生仔日期及只数,此外,还应注意大鼠的外形及精神状态,发现有肿瘤、脱毛、烂尾、腹泻、毛色较差、极度消瘦和精神状态明显不佳的大鼠应整盒处死淘汰。 6、离乳
离乳一般在换窝时同时进行,仔鼠哺乳期一般18~21天,种用仔鼠,哺乳可延长到23天,但不超过25天。过长的哺乳时间会影响母鼠的健康和发情。也可观察仔鼠的生长发育情况进行离乳,一般仔鼠双眼睁开、反应敏捷、具有独立采食能力即达到离乳指征,可进行离乳。将离乳仔鼠按性别区分放在群养盒中饲养、待发。幼鼠性别鉴别主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌,远者为雄。另外,
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雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟,而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。再者,仔鼠雌鼠有较不明显的乳头。
群养大鼠按离乳日期挂牌,并记录品系、性别、离乳时间以便日后发放。饲养密度以刚离乳10只每盒,150g—300g 6只每盒,300g 4只每盒。 7、留种交配
SD大鼠的繁殖,多采用随机交配,选择下代种鼠时,不需要考虑亲代的血缘关系。选择标准主要根据亲代的繁殖、带乳能力,仔代的生长发育和健康状况。选种条件是亲代应具有较高生殖能力,每胎产仔能力8只以上且离乳存活率在95%以上,并具有良好的泌乳能力和对周围环境有较高的适应能力。要求生长发育快,体型大,一般应从第2~3胎生下的仔鼠中选留幼种。SD大鼠体重达200克以上,即可选做种鼠。被选的种鼠应体质强壮,运动活泼,对外界刺激反应敏锐,眼睛鲜红有神,被毛光泽,浓密贴身,尾粗而较长,血管明显,呈粉红色,头部宽广,颈部长度适中,背宽而平直,躯干前后匀称,腹部系紧,胸圆满,四肢短而有力,生殖器正常等条件。
对选留的幼种,填好卡片,分清性别饲养。在育种过程中,应对发育不正常者及时淘汰。选配时应挑选肥度适中的种鼠进行交配。过瘦说明发育不良,过肥的雌鼠,常因卵巢周围沉积脂肪过多,滤泡的发育少,影响卵巢激素的产生和分泌,阻碍卵细胞的成熟和排出,繁殖率低。雄鼠过肥,也会降低性活动和受精能力。SD大鼠通常采用以下两种交配方法
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